小鼠ELISA試劑盒小試管還可以當作比色杯,ELISA試劑盒Z后直接放入分光光度計中比色。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用,包被在固相上的抗原純度大大進步,因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕捉包被法,試驗的特異性、敏感性均由此得以改善,重復性亦佳。聚苯乙烯具有較強的吸附蛋白質(zhì)的機能,抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后仍留存原來的免疫學活性,加之它的價格低廉,所以被普遍采用。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用力。控制反應(yīng)前提,使各孔讀數(shù)在吸光度0.8左右。所有單個讀數(shù)與全部讀數(shù)的均數(shù)之差,應(yīng)小于10%。例如,在檢測抗DNA抗體時,需用DNA作為包被抗原,而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。ELISA板的特點是可以同時進行大量標本的檢測,并可在特制的比色計上迅速讀出結(jié)果。換言之,包被等于抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。在哪一種載體上陽性結(jié)果與陰性結(jié)果差別Z大,這種載體就是這一ELISA測定項目的Z合適的固相載體。
ELISA載體的外形主要有三種:微量滴定板、小珠和小試管。良好的ELISA板應(yīng)該是吸附機能好,空缺值低,孔底透明度高,ELISA試劑盒各板之間、統(tǒng)一板各孔之間、統(tǒng)一板各孔之間機能相近。再者,球型小珠的表面弧度更有利于吸附的抗原決定簇或抗體結(jié)合位點的暴露面處于反應(yīng)狀態(tài),因此珠式ELISA的反應(yīng)往往更為敏捷。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強的吸附力,其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上,抗體結(jié)合點暴露于外,因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。
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