小鼠ELISA試劑盒運(yùn)用前，將一切試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫，避免加樣時(shí)參加很多的氣泡，發(fā)生加樣上的差錯(cuò)。

      ELISA試劑盒依據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個(gè)規(guī)范品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品依據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，ELISA試劑盒能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。

      參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反應(yīng)孔、參加待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育1小時(shí)。

       甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動(dòng)30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。ELISA試劑盒假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育30分鐘。

     甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動(dòng)30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。

ELISA試劑盒每孔參加底物A、B各50ul，ELISA試劑盒悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育10分鐘，避免光照。