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ATCC細(xì)胞活力檢測(cè)主要研究方向

時(shí)間:2018/7/31閱讀:243
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ATCC細(xì)胞活力檢測(cè)是檢測(cè)樣本中健康細(xì)胞的數(shù)目,這在優(yōu)化細(xì)胞培養(yǎng)條件實(shí)驗(yàn)(如未分化細(xì)胞培養(yǎng)、原代細(xì)胞培養(yǎng)等)中是必須的。主要研究方向包括膜損傷檢測(cè)、代謝活性檢測(cè)、DNA合成檢測(cè)等。

1.膜損傷檢測(cè)

使用染料對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色(臺(tái)盼藍(lán)染色法),膜受損細(xì)胞將會(huì)染上色,清點(diǎn)未著色的健康細(xì)胞數(shù)目,從而檢測(cè)細(xì)胞膜的狀態(tài)。

另一種目前更常用的方法是對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的LDH酶活性進(jìn)行檢測(cè)。Cytotoxicity Det.Kit PLUS(LDH) 是使用ELISA方法在96/384孔板中高通量地定量檢測(cè)細(xì)胞毒性。LDH是個(gè)穩(wěn)定的細(xì)胞質(zhì)蛋白,正常情況下在所有細(xì)胞中保持幾乎相同的濃度,因此可通過檢測(cè)受損細(xì)胞釋放的LDH,對(duì)細(xì)胞毒性/細(xì)胞活性進(jìn)行簡(jiǎn)單定量,從而判斷細(xì)胞膜的受損情況。配合使用Cell Proliferation Reagent WST-1能獲得更多細(xì)胞狀態(tài)。

此外,還可通過檢測(cè)上清液中的其他酶活方法來(lái)檢測(cè)細(xì)胞毒性,如堿性磷酸酶、酸性磷酸酶等。

2.代謝活性檢測(cè)

通過添加四咪唑鹽到細(xì)胞中可進(jìn)行線粒體內(nèi)酶代謝活性的測(cè)定?;罴?xì)胞能將四咪唑鹽(如MTT)轉(zhuǎn)化成藍(lán)紫色結(jié)晶甲(Formazan),可通過分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀檢測(cè),如:通過Cell Growth Determination Kit, MTT based(CGD1)進(jìn)行ATCC細(xì)胞代謝活性的檢測(cè)。需要注意的是MTT法形成的Formazan 是水不溶性的,要加有機(jī)溶劑溶解,但在去上清操作時(shí)有可能會(huì)帶走小部分的Formazan,故有時(shí)重復(fù)性略差。因此又開發(fā)出很多種水溶性的四咪唑鹽類:如XTT、CCK-8(WST-8)等。

 Phospho-Pin1 (Ser16) 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子抗體

 phospho-PKA beta (Ser338) 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子抗體

 Phospho-PKA C (Thr197) 促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH(18-39)抗體

 phospho-PKA R2 (Ser96) 促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH (7-23)抗體

 phospho-PKA R2 (Tyr116) 促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39)抗體

 phospho-PKC (Thr500) 促尿鈉排泄肽前體C抗體

 Phospho-PKC alpha/beta II (Thr638/641) 促卵泡刺激素受體抗體

 phospho-PKC beta 1/2(Thr500) 促卵泡刺激素抗體

 phospho-PKC delta (Thr505) 促進(jìn)凋亡基因抗體
ATCC細(xì)胞

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