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腫瘤細(xì)胞降解系統(tǒng)

時間:2018/2/6閱讀:246
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腫瘤細(xì)胞自噬并非隨機(jī)降解系統(tǒng),自噬系統(tǒng)對底物具有特異選擇性,所以通過檢測特異性的白噬降解底物來標(biāo)記自噬成為一項重要的自噬檢測技術(shù)。研究Z為廣泛的自噬降解底物包括p62/sequestosome-1(p62/SQSTM1)及長壽命蛋白。
1.p62/SQSTM1  p62也稱為SQSTM1,是一個泛素樣結(jié)合蛋白,在不同神經(jīng)退行性疾病中都發(fā)現(xiàn)其在胞質(zhì)以及核內(nèi)泛素化的蛋白聚集體處聚集,是蛋白聚集體的組成部分。

p62偶聯(lián)于LC3,作為一種調(diào)節(jié)因子參與自噬體的構(gòu)成,在自噬的中、晚期被降解。細(xì)胞內(nèi)整體p62水平的表達(dá)與自噬活性存在負(fù)相關(guān)。研究證實,在饑餓誘導(dǎo)的自噬缺陷細(xì)胞中可以觀察到p62的累積。因此,蛋白質(zhì)免疫印跡技術(shù)檢測p62水平的降低可以反映自噬活性程度。而p62的增加暗示著自噬、溶酶體降解途徑被抑制。
腫瘤細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)主要有兩條降解途徑:即蛋白酶體系統(tǒng)降解及自噬系統(tǒng)降解。蛋白酶體系統(tǒng)主要降解細(xì)胞內(nèi)的短壽命蛋白,而自噬則負(fù)責(zé)長壽命蛋白和部分細(xì)胞器的降解利用。因此,可以通過標(biāo)記長壽命蛋白的降解產(chǎn)物來檢測自噬。將細(xì)胞與同位素標(biāo)記的氨基酸共培養(yǎng)(多為14C或3H標(biāo)記的纈氨酸或亮氨酸)數(shù)小時以標(biāo)記長壽蛋白,再經(jīng)過一段潛伏期使蛋白酶體系統(tǒng)降解淘汰短壽命蛋白。
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腫瘤細(xì)胞

 

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