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原代細胞轉染困難的原因

時間:2018/1/25閱讀:422
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原代細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養液中呈懸浮狀態生長,如淋巴細胞。在實驗室經常會遇到懸浮細胞的轉染,其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。

目前大多數實驗室用的是脂質體類的轉染試劑,脂質體轉染是基于電荷吸引原理,先形成脂質體-DNA復合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內吞作用,將目的基因導入細胞內,而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。

其次,脂質體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養,易死亡,也給細胞轉染造成了一定的困難。

為了提高懸浮細胞的轉染效率,可以使用非脂質體的轉染試劑,如engreen的Entranster試劑,納米材料的。也可以使用電轉染方法,針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到Z低,如Entranster-E。

原代細胞不易轉染,選對試劑及良好的細胞培養環境才是關鍵。
 白介素-17CIgG    小鼠間粘附分子1(ICAM-1/CD54)
 白介素-17DIgG    小鼠間粘附分子1(ICAM-1/CD54)
 白介素-17EIgG    小鼠甲狀腺素(TAb)
 白介素-17FIgG    小鼠甲狀腺素(T4)
 白介素17受體CIgG    小鼠甲狀腺球蛋白(TG)
 白介素17受體DIgG    小鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)
 白介素17受體IgG    小鼠甲狀旁腺激素相關蛋白(PTHrP)
 白介素1αIgG    小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)
 白介素1βIgG    小鼠甲基化酶(Methylase)
 白介素1-β轉化酶樣凋亡蛋白酶6IgG    小鼠己糖激酶(HK)
原代細胞

 

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