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初級(jí)會(huì)員 | 第10年

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活細(xì)胞直接觀察方法

時(shí)間:2017/6/29閱讀:367
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(一)細(xì)胞系相差觀察和攝影

1.相差裝置的使用 相差裝置或顯微鏡都是由兩部分組成,相差聚光器和相差接物鏡。在每個(gè)相差接物鏡的光學(xué)系統(tǒng)中都有一個(gè)光環(huán)透鏡;在聚光器內(nèi)有數(shù)個(gè)可轉(zhuǎn)換的相位板,一定倍數(shù)的接物鏡使用時(shí)需與相應(yīng)的相位板一致。相差觀察時(shí)對(duì)照明要求嚴(yán)格,光軸要對(duì)正,視野照明光度需均勻。

2.操作步驟

(1)調(diào)好相位板,使聚光器相位板號(hào)與接物鏡放大倍數(shù)(相位板)相一致。

(2)抽取接目鏡,再更換輔助望遠(yuǎn)鏡,移動(dòng)輔助鏡筒并調(diào)整聚光器相位板,使視野中兩個(gè)大小一樣的光環(huán)必須相互吻合。

(3)細(xì)胞系再重新?lián)Q上原接目鏡,即成相差圖像;當(dāng)更換不同倍數(shù)接物鏡時(shí),需按上述過程重新調(diào)節(jié)。

3.注意事項(xiàng)

(1)對(duì)培養(yǎng)瓶、皿要求:相差顯微鏡觀察要求底物平坦、質(zhì)地均勻、透光度強(qiáng);一般玻璃器皿凹凸不平,不適合做相差觀察和攝影,用質(zhì)地均勻的塑料器皿培養(yǎng)較好。

(2)準(zhǔn)備:觀察和攝影前,要擦凈培養(yǎng)瓶表面,切勿殘留污跡而影響透光度。

(3)調(diào)光:調(diào)整照明光的照明度及光軸,使視野照明均勻。對(duì)準(zhǔn)光軸是顯微攝影的重要條件,否則不易獲得理想效果。

(4)細(xì)胞系在無(wú)自控?cái)z像裝置初次拍攝時(shí),應(yīng)將放大倍數(shù)、照明強(qiáng)度和曝光等條件逐一記錄,再做一組不同曝光時(shí)間的試驗(yàn),顯影后選取組合,作為以后再拍攝時(shí)的標(biāo)準(zhǔn)。

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