手机版av在线_96精品国产aⅴ在线观看_中文字幕35页_国产亚洲成AV人片在线观黄桃_全黄性色大片_免费视频h

上海研生實(shí)業(yè)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第10年

15201736385

原代細(xì)胞傳代培養(yǎng)的操作介紹

時(shí)間:2017/5/9閱讀:473
分享:

1.觀察培養(yǎng)基是否正常,原代細(xì)胞狀態(tài)如何,細(xì)胞密度如何,決定是否傳代。觀察時(shí)擰緊蓋子。
2.加熱PBS、versene、培養(yǎng)基,(提前做好) 瓶子不要倒著放,不要讓液體接觸到瓶塞。
3.打開超凈臺(tái)(先開風(fēng)機(jī),后開照明),用75%乙醇清潔臺(tái)面,點(diǎn)燃酒精燈。不要把廢液缸拿出去倒,如果廢液太多,可以用其他容器先裝廢液。取小離心管一個(gè),置于架子上。
4.取尖吸管、吸量管各一支,放置在的架上。放置的方式,注意吸管、吸量管前端都不要與架子接觸。
5.取待傳代的細(xì)胞。打開versene,用酒精燈外焰燒。燒吸管時(shí)距離酒精燈心遠(yuǎn)些,不要把渣滓?guī)нM(jìn)去。把試劑拿入臺(tái)子的時(shí)候,盡量平穩(wěn),不要讓試劑碰到瓶口。
6.用吸量管吸取舊的培養(yǎng)基,置離心管中,吸量管加入versene,然后將versene瓶收起來。(加versene主要是為了將舊培養(yǎng)基洗去)。在離心管中間部分將液體加入。吸液體和加液體時(shí)都不要對(duì)著細(xì)胞。
7.打開胰酶,然后將versene棄掉。換新管,用尖吸管吸取適量胰酶加入。加胰酶后,盡快放平,使原代細(xì)胞消化時(shí)間一致。
8.將細(xì)胞放入37度孵箱。放孵箱2min, 收胰酶,打開PBS. 之后拿出來鏡下隨時(shí)觀察。使用二次消化法,去除容器中殘余的細(xì)胞。別忘了用舊培養(yǎng)基中和。
9.取細(xì)胞,鏡下觀察消化情況。消化程度合適之后(細(xì)胞變圓,但不漂起),用尖吸管棄去胰酶,取離心管中的培養(yǎng)基加入細(xì)胞,吹打,至所有細(xì)胞從培養(yǎng)皿底部脫落下來。用PBS洗細(xì)胞,versene對(duì)細(xì)胞有毒性,且不能被血清中和。然后吸取至離心管中,800 rpm離心5分鐘。
10.吸量管吸取適量培養(yǎng)基加入新的培養(yǎng)皿中。
11.細(xì)胞離心畢,用吸新培養(yǎng)基的管棄去上清,先把泡沫吸走。換吸量管吸取培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基適量,加入離心管,小體積混勻,將細(xì)胞重懸,尖吸管吹勻。
12.擦計(jì)數(shù)板,用槍吸10ul的液體,計(jì)數(shù)。不要把槍伸到離心管內(nèi)。
13.吸量管吸取原代細(xì)胞懸液,加入新的培養(yǎng)皿中。鏡下觀察,搖勻,放入37度孵育。收超凈臺(tái)。

會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
在線留言
主站蜘蛛池模板: 成a人v在线观看视频 | 久久亚洲sm情趣捆绑调教 | 蜜桃麻豆WWW久久囤产精品 | 亚洲色炮av图 | 丰满少妇人妻无码 | 国产中文字幕在线播放 | 奇米777四色 | 国产成人久久综合777777麻豆 | 麻豆视频观看免费视频观看 | 亚洲综合憿情五月丁香五月网 | 国产美女视频a级做爰色戎 一本久久A精品一区二区 | 香蕉久久久久久久AV网站 | 国产免费一区二区三区在线观看 | 久久靖品 | 在线三级av| 久久99久久99精品免视看看 | 波多野结衣先锋在线 | 亚洲一二三四2021不卡 | 一区av在线 | 天天玩天天操天天干 | 日本中文字幕一级片 | 日本一区二区三区精品福利视频 | 毛片三区| 国产一区久久久 | 精品乱码卡1卡2卡3免费开放 | 国产一区二区三区18 | 亚洲丁香婷婷久久一区二区 | 久久精品人 | 国产在线精品拍揄自揄免费 | 午夜性生大片免费观看 | 色香蕉久久 | 我的初次内射欧美成人影视 | 精品一区二区三区日本视频 | 国产黄色大片在线观看 | 少妇在宾馆高潮不断狂叫床 | 国产高清乱子精品偷伦对白 | 日韩精品国产自在久久现线拍 | 少妇宾馆把腿扒开让我添 | 国产成人午夜片在线观看高清观看 | 久久久久久久久99精品情浪 | 一区二区三区四区免费在线观看 |