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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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RBE 細(xì)胞專用培養(yǎng)基

參  考  價(jià):1 - 560 /盒
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號(hào)

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    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    經(jīng)銷商

  • 所在地

    上海市

更新時(shí)間:2025-05-28 15:19:00瀏覽次數(shù):69次

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科研細(xì)胞
原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
保存條件 -20℃、避光 貨號(hào) GOY-XP4406
產(chǎn)品規(guī)格 1*125ml/500ml 用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)
RBE 細(xì)胞專用培養(yǎng)基常采用 DMEM/F12 培養(yǎng)基,添加 10% - 15% 胎牛血清,以及一些生長因子如 EGF 等,有助于 RBE 細(xì)胞(膽管癌細(xì)胞)的生長、增殖和維持其細(xì)胞特性。

RBE 細(xì)胞專用培養(yǎng)基

產(chǎn)品介紹:

RBE 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 

由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持RBE 細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含RBE細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于RBE細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

RPMI-1640(含NaHCO3 1.5g / L)培養(yǎng)基          445 mL

特級(jí)胎牛血清                     50 mL

P/S青霉su-鏈霉su              5 mL

規(guī)格

1*125ml/500ml

保存條件

-20℃、避光

貨號(hào)

GOY-XP4406

用途

僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

注意事項(xiàng):

RBE 細(xì)胞專用培養(yǎng)基
1、收到產(chǎn)品請先檢查包裝是否完好,如有破損,漏液、渾濁等現(xiàn)象請及時(shí)聯(lián)系我們,培養(yǎng)基凍融后,可能會(huì)有少量絮狀物析出,不影響產(chǎn)品正常使用。

2、請仔細(xì)閱讀產(chǎn)品說明書,了解產(chǎn)品使用方法、保存方式、有效期等信息,若因操作失誤,保存不當(dāng)而導(dǎo)致產(chǎn)品出現(xiàn)污染等問題的,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3、本產(chǎn)品僅能用于科研,培養(yǎng)基中的一些組分對人體有較低的危害性,如有接觸立即用大量清水沖洗即可。

運(yùn)輸和保存:

RBE 細(xì)胞專用培養(yǎng)基

運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個(gè)月;-20℃,避光,保存6個(gè)月。

質(zhì)量控制:

RBE 細(xì)胞專用培養(yǎng)基

培養(yǎng)操作:

RBE 細(xì)胞專用培養(yǎng)基
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

RBE 細(xì)胞專用培養(yǎng)基
一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

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