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原代兔支氣管平滑肌細(xì)胞

參  考  價(jià):1 - 600 /件
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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    上海市

更新時(shí)間:2025-04-29 13:34:20瀏覽次數(shù):74次

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科研細(xì)胞
原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
組織來源 支氣管組織 貨號(hào) GOY-01X1512
產(chǎn)品規(guī)格 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁 用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
原代兔支氣管平滑肌細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:SW620/5FU人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞大鼠單核細(xì)胞小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞人根尖牙乳頭干細(xì)胞人椎間盤纖維環(huán)細(xì)胞小鼠膀胱間質(zhì)細(xì)胞人角膜內(nèi)皮細(xì)胞大鼠雪旺細(xì)胞兔陰道真皮成纖維細(xì)胞小鼠頸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

原代兔支氣管平滑肌細(xì)胞


產(chǎn)品名稱

原代兔支氣管平滑肌細(xì)胞

英文名稱

Rabbit Bronchial Smooth Muscle Cells

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號(hào)

GOY-01X1512

組織來源

支氣管組織

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)信息:包被條件

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

傳代特性:可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液:0.25%YI蛋白酶兔支氣管平滑肌細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

 


原代兔支氣管平滑肌細(xì)胞

原代兔支氣管平滑肌細(xì)胞

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

兔支氣管平滑肌細(xì)胞分離自支氣管組織;支氣管(Bronchi),是指由支氣管分出的各級(jí)分枝,由支氣管分出的一級(jí)支氣管,即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較,前者較細(xì)長(zhǎng),走向傾斜;后者較粗短,走向較前者略直,所以經(jīng)支氣管墮入的異物多進(jìn)入右主支氣管。支氣管和支氣管還有以區(qū)別就是,支氣管是以“C"型的支氣管軟骨為支架,而支氣管不是。支氣管平滑肌細(xì)胞主要功能:①支氣管平滑肌細(xì)胞能維持支氣管張力,保持支氣管形態(tài);②支氣管平滑肌特異的超微結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和調(diào)節(jié)機(jī)制是支氣管正常生理功能的基礎(chǔ);③支氣管平滑肌通過分泌細(xì)胞因子和趨化因子等促炎介質(zhì),發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)功能。支氣管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài):大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。
方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的兔支氣管平滑肌細(xì)胞采用YI蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的兔支氣管平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

 


原代兔支氣管平滑肌細(xì)胞

原代兔支氣管平滑肌細(xì)胞

1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,

2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中,盡可能的除去結(jié)締組織等,

3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中,倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中,

4) 2h后,培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基,小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱,確保組織塊不會(huì)飄起來,

5) 每3d換液2mL,待細(xì)胞從組織塊中爬出來后,隔2d換液,待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時(shí),去除組織塊,將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。

原代兔支氣管平滑肌細(xì)胞

大鼠骨細(xì)胞

大鼠成骨細(xì)胞

大鼠軟骨細(xì)胞

ubiquitine 基因檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

大鼠滑膜成纖維細(xì)胞

人乳清蛋白(hLALBA)轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

大鼠骨骼肌細(xì)胞

促生長(zhǎng)轉(zhuǎn)ScGH基因成分檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

大鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞

人溶酶(hLYZ)轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

大鼠纖維環(huán)細(xì)胞

人乳鐵蛋白(hLTF)轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

大鼠髓核細(xì)胞

轉(zhuǎn)基因大米Bt(cryAc)檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

雜交瘤細(xì)胞;ETMcAb3A7

轉(zhuǎn)基因大米Bt(cryAb)檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

大鼠皮膚成纖維細(xì)胞

水稻內(nèi)源基因SPS 檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

大鼠角質(zhì)形成細(xì)胞

大豆內(nèi)源基因Lectin檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

大鼠表皮干細(xì)胞

植物內(nèi)源基因tRNA-Leu檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

大鼠前脂肪細(xì)胞

玉米內(nèi)源基因IVR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

大鼠脂肪微血管內(nèi)皮細(xì)胞

原代兔支氣管平滑肌細(xì)胞轉(zhuǎn)基因植物Cry1A(c)基因檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

大鼠真皮毛乳頭細(xì)胞

轉(zhuǎn)基因植物Bar基因檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

鉤端螺旋體(Lep)檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

轉(zhuǎn)基因植物NPTII基因檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)


原代兔支氣管平滑肌細(xì)胞

1、您收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作:

取出T-25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時(shí)或過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。

2、細(xì)胞傳代:

1)細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4)待細(xì)胞貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。

3、細(xì)胞凍存:

1)細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,再加入培養(yǎng)液終止消化,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)用適當(dāng)量的凍存液(基礎(chǔ)培養(yǎng)基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;

4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。

4、細(xì)胞復(fù)蘇:

1)從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;

2)將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無菌離心管中,滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞,然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中;

3)放置于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4)第二天,換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。



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