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原代兔口腔黏膜成纖維細(xì)胞

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更新時間:2025-04-29 12:27:51瀏覽次數(shù):61次

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科研細(xì)胞
原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
組織來源 口腔黏膜組織 貨號 GOY-01X1497
產(chǎn)品規(guī)格 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁 用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
原代兔口腔黏膜成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:JM1人急性B淋巴細(xì)胞大鼠骨髓肥大細(xì)胞大鼠肝外膽管上皮細(xì)胞小鼠腸黏膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞人甲狀腺上皮細(xì)胞兔前脂肪細(xì)胞兔肝成纖維細(xì)胞小鼠主動脈外膜成纖維細(xì)胞小鼠輸卵管上皮細(xì)胞小鼠肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞

原代兔口腔黏膜成纖維細(xì)胞


產(chǎn)品名稱

原代兔口腔黏膜成纖維細(xì)胞

英文名稱

Rabbit Oral Mucosal Fibroblast Cells

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X1497

組織來源

口腔黏膜組織

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)信息:包被條件

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

傳代特性:可傳3代左右

消化液:0.25%YI蛋白酶兔口腔黏膜成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

 


原代兔口腔黏膜成纖維細(xì)胞

原代兔口腔黏膜成纖維細(xì)胞

細(xì)胞簡介:

兔口腔黏膜成纖維細(xì)胞分離自口腔黏膜組織;口腔(oral cavity)是消化道的起始部分。前借口裂與外界相通,后經(jīng)咽峽與咽相續(xù)??谇粌?nèi)有牙、舌等器官??谇坏那氨跒榇?、側(cè)壁為頰、頂為腭、口腔底為黏膜和肌等結(jié)構(gòu)??谇唤枭稀⑾卵拦譃榍巴鈧?cè)部的口腔前庭(oral vestibule)和后內(nèi)側(cè)部的固有口腔(oral cavity proper);當(dāng)上、下頜牙咬合時,口腔前庭與固有口腔之間可借第三磨牙后方的間隙相通。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的兔口腔黏膜成纖維細(xì)胞采用YI蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的兔口腔黏膜成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

 


原代兔口腔黏膜成纖維細(xì)胞

原代兔口腔黏膜成纖維細(xì)胞

1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,

2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中,盡可能的除去結(jié)締組織等,

3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中,倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中,

4) 2h后,培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基,小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱,確保組織塊不會飄起來,

5) 每3d換液2mL,待細(xì)胞從組織塊中爬出來后,隔2d換液,待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時,去除組織塊,將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。

原代兔口腔黏膜成纖維細(xì)胞

HEL人紅白白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基

HELA人子宮頸癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基

HELA+LUC人宮頸癌熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基

腸桿科耐碳青霉烯類抗藥物基因(VIM/IMP)檢測試劑盒

HET-1A人食管上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基

鮑曼不動桿耐碳青霉烯類抗基因(OXA23/OXA24)檢測試劑盒

chang liver人宮頸癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基

五種致瀉性大腸埃希檢測試劑盒

HeLa.S3人宮頸癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基

腸桿科耐碳青霉烯類抗藥物基因( KPC/NDM/OXA)檢測試劑盒

hepg2.2.15人肝癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基

八種病毒性腹瀉病原體檢測試劑盒

Hep3B2.1-7 [Hep3B]人肝癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基

十種細(xì)性腹瀉病原體檢測試劑盒

小鼠雜交瘤細(xì)胞株;2D11-2

A 組輪狀病毒及基因分型檢測試劑盒

HEY人卵巢癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基

產(chǎn)超廣譜 β- 內(nèi)酰胺酶細(xì)檢測試劑盒

HEY A8人卵巢癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基

耐色葡萄球( MRSA)檢測試劑盒

HFL1人肺成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基

腸桿科耐碳青霉烯類抗藥物基因( KPC)檢測試劑盒

HFF-1人皮膚成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基

耐藥銅綠假單胞檢測試劑盒

HGC-27人胃癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基

原代兔口腔黏膜成纖維細(xì)胞假結(jié)核耶爾森檢測試劑盒

HGC-27+YFP人胃癌黃色熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基

嗜水氣單胞檢測試劑盒

鼠疫桿(YP-PLA/CA/3A)檢測試劑盒(熒光PCR法)

B 組鏈球檢測試劑盒


原代兔口腔黏膜成纖維細(xì)胞

1、您收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作:

取出T-25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時或過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。

2、細(xì)胞傳代:

1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4)待細(xì)胞貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。

3、細(xì)胞凍存:

1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,再加入培養(yǎng)液終止消化,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)用適當(dāng)量的凍存液(基礎(chǔ)培養(yǎng)基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;

4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。

4、細(xì)胞復(fù)蘇:

1)從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;

2)將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無菌離心管中,滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞,然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中;

3)放置于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4)第二天,換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。



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