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組織來源 | 肝動(dòng)脈組織 | 貨號 | GOY-01X1531 |
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產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 |
生長特性 | 貼壁 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
產(chǎn)品名稱 | 原代兔肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 英文名稱 | Rabbit Hepatic Artery Endothelial Cells |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 貨號 | GOY-01X1531 |
組織來源 | 肝動(dòng)脈組織 | 細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)信息:包被條件PLL(0.1mg/ml)或明膠(0.1%)
培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%YI蛋白酶兔肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡介:
兔肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自肝動(dòng)脈組織;在胚胎期,肝臟有3條動(dòng)脈供血,分別來源于胃左動(dòng)脈、腹腔動(dòng)脈和腸系膜上動(dòng)脈,這3條動(dòng)脈分別肝臟的不同部位。出生后,一般保留一條動(dòng)脈,大部分為起源于腹腔動(dòng)脈的動(dòng)脈,由其分出左、右肝動(dòng)脈供應(yīng)左、右半肝。偶爾也可見起源于胃左動(dòng)脈的動(dòng)脈或起源于腸系膜上動(dòng)脈的動(dòng)脈。但也有2條動(dòng)脈并存的情況,如起源于腹腔動(dòng)脈和起源于胃左動(dòng)脈(25%),起源于腹腔動(dòng)脈和起源于腸系臘上動(dòng)脈(10%),而起源于胃左動(dòng)脈和起源于腸系膜上動(dòng)脈的2條動(dòng)脈同時(shí)存在的情況比較少見。此外,還有5%像胚胎期一樣,3條動(dòng)脈同時(shí)存在。這種起源于腹腔動(dòng)脈以外的肝動(dòng)脈稱為迷走肝動(dòng)脈,如果肝臟沒有起源于腹腔動(dòng)脈的動(dòng)脈供血時(shí),此種異位起源的肝動(dòng)脈稱替代動(dòng)脈,如果在常見肝動(dòng)脈類型外,還有一支這種異位起始的動(dòng)脈肝臟的一部分血流,這種肝動(dòng)脈稱副肝動(dòng)脈。肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞是襯于肝動(dòng)脈內(nèi)表面的單層扁平上皮,在炎癥時(shí)高表達(dá)黏附分子,與血流中白細(xì)胞表面黏附分子相互作用,從而介導(dǎo)白細(xì)胞穿越血管壁,亦屬一類非專職抗原提呈細(xì)胞。它們吞噬異物、細(xì)菌、壞死和衰老的組織,還參與集體免疫活動(dòng),包括:①血管收縮及血管舒張,從而控制血壓;②凝血(血栓形成及纖維蛋白溶解);③動(dòng)脈硬化;④血管生成;⑤炎癥及腫脹(浮腫);⑥內(nèi)皮細(xì)胞亦控制一些物質(zhì),如白血球進(jìn)出血管。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞采用混合酶消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗(yàn)室分離的兔肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,
2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中,盡可能的除去結(jié)締組織等,
3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中,倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中,
4) 2h后,培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基,小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱,確保組織塊不會(huì)飄起來,
5) 每3d換液2mL,待細(xì)胞從組織塊中爬出來后,隔2d換液,待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時(shí),去除組織塊,將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。
TM3小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞 | TM4正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞 |
U14小鼠子宮頸癌細(xì)胞 | 甲型流感(流感)病毒H1亞型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
YAC-1小鼠淋巴瘤細(xì)胞 | 甲型流感(流感)病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
9L/lacZ大鼠膠質(zhì)肉瘤細(xì)胞 | 牛腎盂腎炎棒桿探針法熒光定量PCR試劑盒 |
A7r5大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 | 潰瘍棒桿探針法熒光定量PCR試劑盒 |
AR42J大鼠胰腺外分泌腺腫瘤細(xì)胞 | 偽結(jié)核棒桿探針法熒光定量PCR試劑盒 |
BRL大鼠肝細(xì)胞 | 極小棒桿探針法熒光定量PCR試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞;HBRP12-2 | 白喉棒桿探針法熒光定量PCR試劑盒 |
C6大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 | 甲型流感(流感)病毒H1N1亞型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
C6+LUC大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞綠色熒光標(biāo)記 | 甲型流感(流感)病毒H1N2亞型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
CBRH7919大鼠肝癌細(xì)胞 | 甲型流感(流感)病毒H10N7亞型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
CFSC-8B大鼠肝星形細(xì)胞 | 甲型流感(流感)病毒N2亞型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
CTX大鼠腦星形膠質(zhì)細(xì)胞 | 原代兔肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞甲型流感(流感)病毒M1亞型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
CTX-TNA2大鼠腦I型星形膠質(zhì)細(xì)胞 | 甲型流感(流感)病毒H2N2亞型探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
草魚出血熱病毒(GCHV)檢測試劑盒(熒光PCR法) | 甲型流感(流感)病毒H3亞型 探針法熒光定量RT-PCR試劑盒 |
1、您收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作:
取出T-25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時(shí)或過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2、細(xì)胞傳代:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)待細(xì)胞貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存:
1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,再加入培養(yǎng)液終止消化,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)用適當(dāng)量的凍存液(基礎(chǔ)培養(yǎng)基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。
4、細(xì)胞復(fù)蘇:
1)從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無菌離心管中,滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞,然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中;
3)放置于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)第二天,換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
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