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組織來源 | 子宮組織 | 貨號 | GOY-01X0824 |
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產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
生長特性 | 貼壁 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
原代兔子宮平滑肌細胞
英文名稱 | Rabbit Uterine Smooth Muscle Cells | 組織來源 | 子宮組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
生長特性 | 貼壁 | 貨號 | GOY-01X0824 |
培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔子宮平滑肌分離自子宮組織;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時,可以引起子宮脫垂。子宮肌層比較厚,由成束或成片的平滑肌組成,肌束間以結(jié)締組織分隔。子宮平滑肌具有收縮功能,收縮受激素的調(diào)節(jié),其收縮活動有助于精子向輸卵管運送、經(jīng)血排出以及胎兒娩出。子宮平滑肌層含有大量的血管,如果平滑肌層細胞過度生長,勢必造成血管壁的增厚,管腔堵塞,體外培養(yǎng)平滑肌細胞有利于研究子宮和其他富含血管器官的血管形成機制。子宮平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。子宮平滑肌細胞的主要功能:①子宮平滑肌能保持子宮的基本形態(tài),在孕期能大化的擴張子宮容積,保證胎兒孕育環(huán)境;②平滑肌細胞有收縮舒張能力,在生產(chǎn)時能形成生理性的縮腹環(huán),推動胎兒向下移動,輔助生產(chǎn)。 |
方法簡介:
公司實驗室分離的兔子宮平滑肌采用yi蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的兔子宮平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1. 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
2. 消化培養(yǎng)法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應用酶的生化作用和 非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團塊膨松,由塊狀 變成 絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠 瓶中振蕩,使細胞團塊得以較充分的分散,制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液,接種培養(yǎng)后,細胞容易貼壁生長。
3. 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
4. 器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
1. 取材的組織要盡快培養(yǎng)。如若不能及時培養(yǎng),可將組織浸泡于培養(yǎng)液內(nèi),放置于冰浴或4℃冰箱中,如果組織塊很大,應切成1cm3以下的小塊再低溫保存,但時間不能超過24h。
2. 從消化道、周圍有壞死組織等污染因素存在的區(qū)域取材,可用含500~1000u/ml的青BSS液漂洗5~10min,或用10%注射液沖洗浸泡10min再作培養(yǎng)。
3. 組織塊不易貼壁,可預先在瓶壁涂薄層血清、胎汁或鼠尾膠原等。
4. 原代培養(yǎng)的1~2d內(nèi)要特別注意觀察是否有細菌、真菌、霉菌的污染,一旦發(fā)現(xiàn),要及時清除。
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