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原代兔膀胱成纖維細(xì)胞

參  考  價(jià):1 - 600 /件
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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更新時(shí)間:2025-04-29 09:39:18瀏覽次數(shù):44次

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科研細(xì)胞
原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
組織來(lái)源 膀胱組織 貨號(hào) GOY-01X0764
產(chǎn)品規(guī)格 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁 用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
原代兔膀胱成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:EPLC272H人肺腺癌細(xì)胞大鼠原代視網(wǎng)膜色上皮細(xì)胞人原代真皮微血管周細(xì)胞小鼠原代肝外膽管上皮細(xì)胞大鼠脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞人原代外周血間充質(zhì)干細(xì)胞大鼠原代腹腔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞小鼠原代臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞大鼠原代腎小球系膜細(xì)胞兔原代骨骼肌成纖維細(xì)胞

原代兔膀胱成纖維細(xì)胞


產(chǎn)品名稱

原代兔膀胱成纖維細(xì)胞

英文名稱

Rabbit Bladder Fibroblast Cells

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號(hào)

GOY-01X0764

組織來(lái)源

膀胱組織

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

 


原代兔膀胱成纖維細(xì)胞

原代兔膀胱成纖維細(xì)胞

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

兔膀胱成纖維分離自膀胱組織;膀胱是一個(gè)儲(chǔ)尿器官,在哺乳類動(dòng)物,它是由平滑肌組成的一個(gè)囊形結(jié)構(gòu),位于骨盆內(nèi),其后端開(kāi)口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌,可以控制尿液的排出。膀胱壁由三層組織組成,由內(nèi)向外為黏膜層、肌層和外膜。肌層由平滑肌纖維構(gòu)成,稱為逼尿肌,逼尿肌收縮,可使膀胱內(nèi)壓升高,壓迫尿液由尿道排出。在膀胱與尿道交界處有較厚的環(huán)形肌,形成尿道內(nèi)括約肌。在括約肌收縮能關(guān)閉尿道內(nèi)口,防止尿液自膀胱漏出。膀胱壁分為三層:即漿膜層(蜂窩脂肪組織)、肌肉層(逼尿肌、膀胱三角區(qū)肌)和黏膜層(極薄的一層移行上皮組織)。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的膀胱成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開(kāi)始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁wan全,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。膀胱成纖維細(xì)胞分泌的生長(zhǎng)因子是一種具有多功能的促有絲分裂原,研究已表明其參與惡性腫瘤的形成過(guò)程。近年來(lái),堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子在膀胱癌發(fā)病過(guò)程中的作用、與生物學(xué)行為之間的關(guān)系以及治療上的應(yīng)用已受到重視。
方法簡(jiǎn)介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔膀胱成纖維采用yi蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔膀胱成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

 


原代兔膀胱成纖維細(xì)胞

原代兔膀胱成纖維細(xì)胞

1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,

2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中,盡可能的除去結(jié)締組織等,

3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中,倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中,

4) 2h后,培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基,小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱,確保組織塊不會(huì)飄起來(lái),

5) 每3d換液2mL,待細(xì)胞從組織塊中爬出來(lái)后,隔2d換液,待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時(shí),去除組織塊,將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。

原代兔膀胱成纖維細(xì)胞

人慢性骨髓單核細(xì)胞性白血病MV-4-11(STR鑒定正確)

小鼠胰島瘤胰島β細(xì)胞Beta-TC-6(種屬鑒定)

人胃癌細(xì)胞熒光標(biāo)記 NCI-N87+luc (STR鑒定正確)

伊氏錐蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

人骨髓瘤細(xì)胞NCI-H929(STR鑒定正確)

馬媾疫錐蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

人胚腎上皮包裝細(xì)胞GP2-293(STR鑒定正確)

剛果錐蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H1734(STR鑒定正確)

克氏錐蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

人子宮內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞hEM15A (STR鑒定正確)

布氏羅得西亞錐蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

人胃癌細(xì)胞(未分化)HGC-27(STR鑒定正確)

布氏岡比亞錐蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞;Y1

布氏布氏錐蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

大鼠膠質(zhì)肉瘤細(xì)胞9L/lacZ(種屬鑒定)

活動(dòng)錐蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H1299(STR鑒定正確)

猿猴錐蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒

人肝癌細(xì)胞SNU-398(STR鑒定正確)

超廣譜β-內(nèi)酰胺酶大腸桿菌(大腸埃希氏菌)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞帶紅色熒光RAW264.7+RFP(種屬鑒定)

同羊皰疹病毒2型) 羊關(guān)聯(lián)惡性卡他熱病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231(STR鑒定正確)

原代兔膀胱成纖維細(xì)胞鄂木斯克出血熱病毒探針?lè)晒舛?/span>RT-PCR試劑盒

人卵巢癌細(xì)胞HEY A8(STR鑒定正確)

恩杜姆病毒探針?lè)晒舛?/span>RT-PCR試劑盒

馬鏈球菌(S. equi)檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)

韋塞爾斯布朗病毒探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒


原代兔膀胱成纖維細(xì)胞

1、您收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作:

取出T-25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時(shí)或過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。

2、細(xì)胞傳代:

1)細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4)待細(xì)胞貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。

3、細(xì)胞凍存:

1)細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,再加入培養(yǎng)液終止消化,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)用適當(dāng)量的凍存液(基礎(chǔ)培養(yǎng)基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;

4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過(guò)夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。

4、細(xì)胞復(fù)蘇:

1)從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無(wú)結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;

2)將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無(wú)菌離心管中,滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞,然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中;

3)放置于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4)第二天,換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。



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