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原代小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)

參  考  價(jià):1 - 600 /件
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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    其他品牌

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    經(jīng)銷商

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更新時(shí)間:2025-04-27 10:57:15瀏覽次數(shù):55次

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科研細(xì)胞
原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
組織來(lái)源 外周血 貨號(hào) GOY-01X1261
產(chǎn)品規(guī)格 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞形態(tài) 樹突狀
生長(zhǎng)特性 半貼半懸浮 用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
原代小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)的相關(guān)產(chǎn)品:Nalm6-LUC-puro人B淋巴白血病細(xì)胞786-O-plv-luc-BSD人腎癌細(xì)胞A498-LUC-PURO人腎癌細(xì)胞SK-NEP-1 (STR)人腎母細(xì)胞SK-WEP-1人腎母細(xì)胞Hkb20 (STR)人腎上皮細(xì)胞Phoenix-AMPHO人腎上皮細(xì)胞Lenti-X293T人腎上皮細(xì)胞Lentix293人腎上皮細(xì)胞NCI-H295R人腎上

原代小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

小鼠外周血DC分離自外周血,由外周血單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。DC細(xì)胞,全稱樹突狀細(xì)胞(DC),是近年來(lái)倍受們關(guān)注的專職抗原呈遞細(xì)胞(APC),能攝取、加工及呈遞抗原,啟動(dòng)T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。由美國(guó)學(xué)者Steinman于1973年在淋巴結(jié)中發(fā)現(xiàn),從脾臟中分離出一類與粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞形態(tài)和功都不同的白細(xì)胞,因其細(xì)胞膜向外伸出,形成與神經(jīng)細(xì)胞軸突相似的膜性樹狀突起,故而命名為樹突狀細(xì)胞。未成熟DC具有較強(qiáng)的遷移能力,成熟DC能有效激活初始型T細(xì)胞,處于啟動(dòng)、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)。
方法簡(jiǎn)介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血DC采用密度梯度離心法分離外周血單個(gè)核細(xì)胞、培養(yǎng)過(guò)程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

 


原代小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)


產(chǎn)品名稱

原代小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)

英文名稱

Mouse Peripheral Blood Maturation Dendritic Cells

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號(hào)

GOY-01X1261

組織來(lái)源

外周血

細(xì)胞形態(tài)

樹突狀

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 半貼半懸浮

細(xì)胞形態(tài) 樹突狀

傳代特性 屬于高度分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

 


原代小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)


原代小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)

1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,

2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中,盡可能的除去結(jié)締組織等,

3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中,倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中,

4) 2h后,培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基,小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱,確保組織塊不會(huì)飄起來(lái),

5) 每3d換液2mL,待細(xì)胞從組織塊中爬出來(lái)后,隔2d換液,待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時(shí),去除組織塊,將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。原代小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)

原代小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)

1、您收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作:

取出T-25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時(shí)或過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。

2、細(xì)胞傳代:

1)細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4)待細(xì)胞貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。

3、細(xì)胞凍存:

1)細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,再加入培養(yǎng)液終止消化,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)用適當(dāng)量的凍存液(基礎(chǔ)培養(yǎng)基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;

4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過(guò)夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。

4、細(xì)胞復(fù)蘇:

1)從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無(wú)結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;

2)將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無(wú)菌離心管中,滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞,然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中;

3)放置于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4)第二天,換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

原代小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)

小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);DG6-GFP

小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過(guò)表達(dá));DG6-VAP33-GFP

人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;DMS153

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綠色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸癌細(xì)胞;HCT116-GFP

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人乳腺癌細(xì)胞(上皮粘性蛋白基因修飾);Ecad231-7

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人惡性多發(fā)性畸胎瘤細(xì)胞;NTERA-2

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小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);LA1-GFP

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小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過(guò)表達(dá));LA1-VAP33-GFP

鴨肝炎病毒2型染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

人乳腺上皮細(xì)胞;MCF-10A

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人乳腺癌細(xì)胞(紅色熒光蛋白標(biāo)記);MDA-MB-231-Red3

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人結(jié)腸癌細(xì)胞;NCI-H508

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