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原代小鼠外周血單核細(xì)胞

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更新時間:2025-04-27 10:56:11瀏覽次數(shù):63次

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ATCC細(xì)胞
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科研細(xì)胞
原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
組織來源 外周血 貨號 GOY-01X1255
產(chǎn)品規(guī)格 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣
生長特性 貼壁 用途 僅供科研研究實驗
原代小鼠外周血單核細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:Daudi-LUC-eGFP-puro人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞SK-BR-3/LUC (STR)人乳腺腺癌細(xì)胞CAMA-1人乳腺腺癌細(xì)胞MDA-MB-231-EGFP-LUC人三陰性乳腺癌綠色熒光蛋白-熒光酶標(biāo)記MO3.13
(STR)人少突膠質(zhì)細(xì)胞UPCI:SCC154人舌鱗癌細(xì)胞UPCI:SCC152人舌鱗癌細(xì)胞CAL-33人舌鱗癌細(xì)胞UPCISCC0

原代小鼠外周血單核細(xì)胞


產(chǎn)品名稱

原代小鼠外周血單核細(xì)胞

英文名稱

Mouse Peripheral Blood Monocyte Cells

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X1255

組織來源

外周血

細(xì)胞形態(tài)

巨噬細(xì)胞樣

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣

傳代特性 不增殖;不傳代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

 


原代小鼠外周血單核細(xì)胞

原代小鼠外周血單核細(xì)胞

細(xì)胞簡介:

小鼠外周血單核分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。單核細(xì)胞起源于骨髓中的造血干細(xì)胞,并在骨髓中發(fā)育。當(dāng)它們從骨髓進(jìn)入血液時仍然是尚未成熟的細(xì)胞。與其他血細(xì)胞比較,單核細(xì)胞內(nèi)含有更多的非特異性脂酶,并且具有更強(qiáng)的吞噬作用。單核細(xì)胞在血液中停留2-3天后遷移到周圍組織中,細(xì)胞體積繼續(xù)增大,直徑可達(dá)50-80μm,細(xì)胞內(nèi)所含的溶酶體顆粒和線粒體的數(shù)目也增多,成為成熟的細(xì)胞。固定在組織中的單核細(xì)胞稱為組織巨噬細(xì)胞,它們經(jīng)常大量存在于淋巴結(jié)、肺泡壁、骨髓、肝和脾等器官。激活了的單核細(xì)胞和組織巨噬細(xì)胞能生成并釋放多種細(xì)胞毒、干擾素和白細(xì)胞介素,參與機(jī)體防衛(wèi)機(jī)制,還產(chǎn)生一些能促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞生長的因子。在炎癥周圍單核細(xì)胞能進(jìn)行細(xì)胞分裂,并包圍異物。
方法簡介:

公司實驗室分離的小鼠外周血單核采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的小鼠外周血單核經(jīng)CD14免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

 


原代小鼠外周血單核細(xì)胞

原代小鼠外周血單核細(xì)胞

1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,

2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中,盡可能的除去結(jié)締組織等,

3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中,倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中,

4) 2h后,培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基,小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱,確保組織塊不會飄起來,

5) 每3d換液2mL,待細(xì)胞從組織塊中爬出來后,隔2d換液,待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時,去除組織塊,將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。

原代小鼠外周血單核細(xì)胞

人外周血淋巴細(xì)胞;CCRF-SD

人皮膚T淋巴瘤細(xì)胞;Hut78

人胰腺癌細(xì)胞;PANC-1

邊緣無漿體(無形體)染料法熒光定量PCR試劑盒

小鼠肝癌細(xì)胞;Hepa1-6[Hepa1-6]

中央無漿體(無形體)染料法熒光定量PCR試劑盒

人惡性黑色瘤細(xì)胞;A375[A-375]

中山病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞;RBL-1

無漿體(無形體)通用染料法熒光定量PCR試劑盒

人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-204

饒氏無綠藻染料法熒光定量PCR試劑盒

人黑色瘤細(xì)胞;A875

魏氏無綠藻染料法熒光定量PCR試劑盒

人低分化肺腺癌細(xì)胞;GLC-82[GLC82]

無綠藻通用染料法熒光定量PCR試劑盒

GFP標(biāo)記的小鼠子宮頸癌細(xì)胞;U14-GFP

嗜吞噬細(xì)胞無漿體(無形體)染料法熒光定量PCR試劑盒

人肺鱗癌細(xì)胞;LTEP-S

七星庫道蟲染料法熒光定量PCR試劑盒

小鼠正常肝細(xì)胞;NCTC1469

乙型流感病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

貓腎細(xì)胞;CRFK

乙型腦炎(乙腦)病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

人卵巢癌細(xì)胞;ES-2

原代小鼠外周血單核細(xì)胞弗氏檸檬酸桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒

人絨毛膜癌細(xì)胞;JEG-3

麥芽香肉桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒

新城疫病毒中強(qiáng)毒(NDV-W)檢測試劑盒(熒光PCR法)

異尖線蟲屬染料法熒光定量PCR試劑盒


原代小鼠外周血單核細(xì)胞

1、您收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作:

取出T-25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時或過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。

2、細(xì)胞傳代:

1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4)待細(xì)胞貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。

3、細(xì)胞凍存:

1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,再加入培養(yǎng)液終止消化,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)用適當(dāng)量的凍存液(基礎(chǔ)培養(yǎng)基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;

4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。

4、細(xì)胞復(fù)蘇:

1)從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;

2)將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無菌離心管中,滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞,然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中;

3)放置于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4)第二天,換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。



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