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組織來源 | 牙周膜組織 | 貨號 | GOY-01X1264 |
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產品規格 | 5×105Cells/T25培養瓶 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
生長特性 | 貼壁 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
細胞簡介:
大鼠牙周膜成纖維分離自牙周膜組織;牙周膜(牙周韌帶、牙周間隙)是由致密結締組織所構成。多數纖維排列成束,纖維的一端埋于牙骨質內,另一端則埋于牙槽窩骨壁里,使牙齒固位于牙槽窩內;牙周膜內有神經、血管、淋巴和上皮細胞等。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的牙周膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁wan全,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。牙周膜成纖維細胞(PLFs)作為牙周膜的主體細胞,是牙周膜主要的間質細胞,它不僅具有合成膠原、基質、彈力纖維和糖蛋白的功能,還有吸收膠原吞噬異物的能力,還參與了牙周組織的病變、修復及再生過程。現在,利用牙周膜細胞建立體外模型,已經成為有關員研究牙周組織疾病的重要手段。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠牙周膜成纖維采用膠原酶-yi蛋白酶聯合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠牙周膜成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 原代大鼠牙周膜成纖維細胞 | 英文名稱 | Rat Periodontal Ligament Fibroblast Cells |
規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 貨號 | GOY-01X1264 |
組織來源 | 牙周膜組織 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態最佳
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,
2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預冷的PBS中,盡可能的除去結締組織等,
3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養瓶中,倒置于細胞培養箱中,
4) 2h后,培養瓶中注入2 mL內皮培養基,小心將培養瓶正置于培養箱,確保組織塊不會飄起來,
5) 每3d換液2mL,待細胞從組織塊中爬出來后,隔2d換液,待細胞融合達到60-70%左右時,去除組織塊,將肺微血管內皮細胞重新鋪瓶。
1、您收到細胞后,請按照以下方法進行操作:
取出T-25cm2培養瓶,75%酒精擦拭培養瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中靜置4-6小時或過夜,以穩定細胞狀態,然后換用新鮮培養液繼續培養或進行傳代。
2、細胞傳代:
1)細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時,棄25cm2培養瓶中的培養液,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入培養液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)棄上清,沉淀細胞用12ml培養基重懸,然后按1:2比例進行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;
4)待細胞貼壁后,觀察培養結果,之后進行換液培養或傳代。
3、細胞凍存:
1)細胞生長至覆蓋培養瓶的80%面積時,棄25cm2培養瓶中的培養液,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后輕輕吹打細胞使之脫落,再加入培養液終止消化,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)用適當量的凍存液(基礎培養基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細胞,并放置于凍存管中;
4)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉入液氮中進行長期保存。
4、細胞復蘇:
1)從液氮中取出細胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細胞移至15ml無菌離心管中,滴加入培養液5ml混勻細胞,然后將細胞懸液轉移至適當面積大小的培養皿中;
3)放置于37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;
4)第二天,換用新鮮培養基繼續培養。
人腹膜間皮細胞 | 人腹膜微血管內皮細胞 |
人肝癌細胞 | 蒼白密螺旋體梅毒螺旋體PCR檢測試劑盒 |
人肝癌相關成纖維細胞 | 極細密螺旋體PCR檢測試劑盒 |
人肝成纖維細胞 | 文氏密螺旋體PCR檢測試劑盒 |
人肝動脈內皮細胞 | 潰蝕齒密螺旋體PCR檢測試劑盒 |
人肝動脈平滑肌細胞 | 布氏旋毛蟲PCR檢測試劑盒 |
人肝竇內皮細胞 | 米氏旋毛蟲PCR檢測試劑盒 |
人卵巢癌細胞OV-90(STR鑒定正確) | 鄉土旋毛蟲PCR檢測試劑盒 |
人肝內膽管上皮細胞 | 梅毒螺旋體梅毒亞種PCR檢測試劑盒 |
人肝實質細胞 | 齒垢密螺旋體PCR檢測試劑盒 |
人肝外膽管上皮細胞 | 斑點病密螺旋體PCR檢測試劑盒 |
人肝纖維母細胞 | 剛地弓形蟲PCR檢測試劑盒 |
人肝星狀細胞 | 原代大鼠牙周膜成纖維細胞托克特諾病毒PCR檢測試劑盒 |
人睪丸白膜成纖維細胞 | 蜱傳出血熱病毒PCR檢測試劑盒 |
植物內源基因tRNALeu檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) | 即蜱傳腦炎病毒PCR檢測試劑盒 |
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