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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>原代細(xì)胞>>大鼠原代細(xì)胞>> 原代大鼠背根神經(jīng)元細(xì)胞
組織來(lái)源 | 脊髓組織 | 貨號(hào) | GOY-01X1083 |
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產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 細(xì)胞形態(tài) | 神經(jīng)元細(xì)胞樣 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠背根神經(jīng)元分離自脊椎背根神經(jīng)節(jié);感覺(jué)神經(jīng)母細(xì)胞發(fā)出軸突,呈束狀,左右對(duì)稱(chēng)地從神經(jīng)管的背部進(jìn)入,此時(shí)的脊神經(jīng)節(jié)即改稱(chēng)為背根神經(jīng)節(jié)。神經(jīng)系統(tǒng)最基本的結(jié)構(gòu)和功能單位是神經(jīng)元,即神經(jīng)細(xì)胞,其大小和外觀在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中差異很大。但都具有胞體和樹(shù)突、軸突。胞體又叫核周體,內(nèi)含神經(jīng)絲、微管、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、游離核糖體和一個(gè)有明顯核仁的核。一些大神經(jīng)元突起的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可用Nissl染色顯示,在光鏡下是灰藍(lán)色斑塊狀,稱(chēng)為尼氏小體。樹(shù)突和軸突是神經(jīng)元的突起,能在神經(jīng)元之間傳遞電沖動(dòng),突起的大小和形態(tài)各不相同,很難用常規(guī)的顯微鏡鑒別。脊髓背根神經(jīng)節(jié)是周?chē)窠?jīng)的主要傳入神經(jīng)元,是感覺(jué)信號(hào)傳導(dǎo)的中繼站。背根神經(jīng)元細(xì)胞的獲取較為困難,需要在盡可能短的時(shí)間內(nèi)通過(guò)解剖顯微鏡獲得一定量的背根神經(jīng)節(jié)組織。神經(jīng)組織體外培養(yǎng)方法是當(dāng)代神經(jīng)科學(xué)一項(xiàng)很有價(jià)值的研究手段,背根神經(jīng)節(jié)富含周?chē)窠?jīng)系統(tǒng)感覺(jué)神經(jīng)元,已廣泛用于軸突的導(dǎo)向及再生、中樞及周?chē)窠?jīng)系統(tǒng)的髓鞘形成、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子作用及受體分布、神經(jīng)細(xì)胞衰老機(jī)制、基因治療、組織工程等神經(jīng)科學(xué)的研究。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠背根神經(jīng)元采用膠原酶-聯(lián)合消化法、神經(jīng)元專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠背根神經(jīng)元經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 原代大鼠背根神經(jīng)元細(xì)胞 | 英文名稱(chēng) | Rat Dorsal Root Neuron Cells |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 貨號(hào) | GOY-01X1083 |
組織來(lái)源 | 脊髓組織 | 細(xì)胞形態(tài) | 神經(jīng)元細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
1、您收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作:
取出T-25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時(shí)或過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2、細(xì)胞傳代:
1)細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)待細(xì)胞貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存:
1)細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,再加入培養(yǎng)液終止消化,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
3)用適當(dāng)量的凍存液(基礎(chǔ)培養(yǎng)基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過(guò)夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。
4、細(xì)胞復(fù)蘇:
1)從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無(wú)結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2)將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無(wú)菌離心管中,滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞,然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中;
3)放置于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)第二天,換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,
2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中,盡可能的除去結(jié)締組織等,
3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中,倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中,
4) 2h后,培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基,小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱,確保組織塊不會(huì)飄起來(lái),
5) 每3d換液2mL,待細(xì)胞從組織塊中爬出來(lái)后,隔2d換液,待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時(shí),去除組織塊,將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。
小鼠肉瘤瘤株 | 人角膜上皮細(xì)胞 |
人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞 | 傳染性膿皰皮炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
人胰腺癌細(xì)胞(干細(xì)胞庫(kù)保藏) | 短古柏線蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 |
貓星形腦膠質(zhì)細(xì)胞 | 點(diǎn)狀古柏線蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 |
彌漫性組織淋巴瘤細(xì)胞 | 節(jié)狀古柏線蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 |
紅色熒光蛋白標(biāo)記人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 | 匙形古柏線蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 |
人肝內(nèi)膽管癌細(xì)胞系 | 古柏線蟲(chóng)通用PCR檢測(cè)試劑盒 |
人視網(wǎng)膜色上皮細(xì)胞ARPE-19(STR鑒定正確) | 茹拉巴德古柏線蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 |
黑人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞 | 鴿皰疹病毒型PCR檢測(cè)試劑盒 |
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 | 病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
人Burkkit淋巴瘤細(xì)胞 | 腦多頭囊蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 |
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 | 嗜人錐蠅PCR檢測(cè)試劑盒 |
人甲狀腺癌細(xì)胞HTh-7(干細(xì)胞庫(kù)保藏) | 原代大鼠背根神經(jīng)元細(xì)胞球孢子菌通用PCR檢測(cè)試劑盒 |
人甲狀腺癌細(xì)胞KTC-1(干細(xì)胞庫(kù)保藏) | 波薩達(dá)斯球孢子菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
諾如病毒 G Ⅱ型檢測(cè)試劑盒 | 粗球孢子菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
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