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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第10年

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馬可尼小囊蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒廠(chǎng)家

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠(chǎng)商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2019-04-17 10:59:19瀏覽次數(shù):176次

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elisa檢測(cè)試劑盒
ATCC細(xì)胞
標(biāo)準(zhǔn)品
生化試劑
培養(yǎng)基
PCR檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染
熒光定量PCR試劑盒
試劑盒
進(jìn)口elisa試劑盒
科研抗體
科研菌種
生化檢測(cè)試劑盒
科研細(xì)胞
原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
馬可尼小囊蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒廠(chǎng)家保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

組成及試劑配制:
1、馬可尼小囊蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒廠(chǎng)家酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)謩e配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。

產(chǎn)品名稱(chēng)英文名稱(chēng)價(jià)格
馬可尼小囊蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒廠(chǎng)家Abalone Spherical VirusPCR電詢(xún)


樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【標(biāo)本要求】
人體鼻腔或咽部分泌物:用無(wú)菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,將分泌物或咽拭子置入無(wú)菌玻璃管(含0.4ml滅菌生理鹽水),用無(wú)菌棉球?qū)⒃嚬苋o后,密閉送檢。標(biāo)本可立即用于檢測(cè),也可保存于-20℃待測(cè)。
【檢驗(yàn)方法】
1.標(biāo)本、對(duì)照品的核酸裂解處理
用商品化(取得醫(yī)療器械許可證)的RNA提取試劑盒處理標(biāo)本,具體操作參見(jiàn)該試劑盒說(shuō)明書(shū)。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l樣品置于1.5ml 離心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混勻器上振蕩混勻5sec或顛倒混勻15次; 13000rpm離心15min, 吸取上層液體,加入等體積異丙醇,顛倒混勻室溫靜置10min, 13000rpm離心10min,輕輕倒去上清;加入700?l 75%乙醇,顛倒洗滌,13000rpm離心5min,輕輕倒去上清,倒置于吸水紙上,棄盡液體或4000rpm離心5sec,將管壁上的殘余液體甩到管底部,用微量加樣器盡量吸干液體,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.試劑配制
取n×19?l H7N9核酸熒光PCR檢測(cè)混合液與n×1?l RT-PCR酶(n為反應(yīng)管數(shù)),振蕩混勻數(shù)秒, 3000rpm離心數(shù)秒。
3.加樣取上述混合液20?l置于PCR管中,然后將樣品核酸提取液、DEPC-H2O、陽(yáng)性對(duì)照品各5?l分別加入PCR管中,蓋好管蓋,立即進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
4. PCR擴(kuò)增反應(yīng)管置于定量熒光PCR儀上,推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:
45℃×10min; 95℃×15min;循環(huán)一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循環(huán)45次;單點(diǎn)熒光檢測(cè)在60℃,反應(yīng)體系為25?l。
熒光通道檢測(cè)選擇:選用FAM通道。

細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白NA抗體
同源盒蛋白NOBOX抗體
轉(zhuǎn)錄因子NAC1抗體
神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體抗體
磷酸化KB抑制蛋白激酶ε
磷酸化神經(jīng)纖毛蛋白1抗體
1型神經(jīng)纖維瘤抗體
磷酸化1型神經(jīng)纖維瘤抗體
中心粒蛋白Nudel抗體
磷酸化中心粒蛋白Nudel抗體
類(lèi)固醇脫氫酶樣蛋白NSDHL抗體
磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體
磷酸化1型神經(jīng)纖維瘤抗體
磷酸化谷氨酸受體2B抗體
磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體
磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體
磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體
磷酸化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體
磷酸化IKB α抗體
磷酸化IKB alpha抗體
磷酸化核因子活化T細(xì)胞胞漿蛋白2抗體
還原型輔酶Ⅱ氧化酶5/煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸抗體
細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白NANOS2抗體
細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子 p52/p100抗體
磷酸化細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子p100抗體
N-乙酰基轉(zhuǎn)移酶2抗體
富含亮氨酸重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體
孤兒核受體TAK1抗體
骨巢蛋白抗體
軸突生長(zhǎng)誘向因子5抗體
磷酸化p-IκB-α抗體
G21蛋白質(zhì)抗體
醌氧化還原酶抗體
神經(jīng)肽Y1受體抗體
谷氨酸受體1抗體
谷氨酸受體調(diào)節(jié)蛋白2抗體
腈水解酶1抗體
神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白抗體
核孔蛋白50抗體
軸索過(guò)度生長(zhǎng)抑制因子-A抗體

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

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