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小鼠SRSV轉化的3T3細胞:SRSV/3T3

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-10 15:13:07瀏覽次數:137次

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科研菌種
生化檢測試劑盒
科研細胞
原代細胞
細胞培養
貨號 GOY-01X0526
小鼠SRSV轉化的3T3細胞:SRSV/3T3 公司正在出售的產品:1g 5,5- 二硫代雙 (2- 苯甲酸 ) (5,5’-Dithiobis(2-Nitrobenzoic Acid) 室溫干燥保存50T 鼻病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存20次 免疫蛋白清除劑 2 ug pXeX pXeX 低溫運輸,-20℃保存10次 Southern級真菌DNAout

公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。

產品名稱

小鼠SRSV轉化的3T3細胞:SRSV/3T3 

規格

1×10?cells/T25培養瓶

分類

細胞系

貨號

GOY-01X0526

商品介紹:

名稱 小鼠SRSV轉化的3T3細胞:SRSV/3T3 

生長特性懸浮細胞

細胞形態圓形

背景描述SRSV/3T3細胞是NIH/3T3細胞用SRS小鼠腹水瘤無細胞提取物感染并在體外傳代培養而來。在感染過的NIH/3T3細胞的細胞質中發現了A型和C型病毒顆粒,發現細胞中有逆轉錄酶和自由的白血病病毒前病毒-DNA。用這個培養SRSV/3T3細胞對BALB/c裸鼠進行皮下接種,100%誘導生成纖維肉瘤。

生長培養基RPMI-164010% FBS1% P/S

推薦傳代比例1×10^5-1×10^6/mL

推薦換液頻率2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養條件

氣相:空氣,95%CO25%

溫度:37℃

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;

4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

 

培養操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

CD16a / FCGR3A 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 CD28 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

食蟹猴 HAVCR1 / TIM1 / TIMD1 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

小鼠 EFNA2 / Ephrin-A2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

CD19 / Leu-12 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

COQ7 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

IL-29 / Interleukin-29 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

恒河

小鼠SRSV轉化的3T3細胞:SRSV/3T3 Bcl-2  Bcl-2抗體 規格: 0.1ml

EIF5  真核翻譯起始因子5抗體 0.2ml

C1orf94  1號染色體開放閱讀框94抗體 規格: 0.2mlXAF1/FBXO39  XIAP相關因子1凋亡抑制蛋白抗體 規格: 0.1ml

Gentamicin(3G7)  單克隆抗體 規格: 0.2ml

1mL RNA Sample Buffer (without EB)  RNA Sample Buffer (without EB)  常溫保存

MAD1  Mad1抗體 規格: 0.1ml

Phospho-NFKB1(Ser893)  磷酸化細胞核因子p50/k基因結合核因子抗體 規格: 0.1ml

RAB21  G蛋白家族RAB21蛋白抗體 規格: 0.2ml

Uricase  尿酸 規格: 0.1mlCD2  CD2抗體 規格: 0.1ml

OCIAD2  卵巢免疫反應抗原抗體 規格: 0.2mlRNF113B  環指蛋白113B抗體 規格: 0.2ml

10次 糖蛋白染色試劑盒 Staining Kit for Glycoprotein -20℃保存

100mL 交聯瓊脂糖凝膠 6B Sepharose CL-6B  4-8℃保存

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