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人原代皮膚成纖維細胞專用培養(yǎng)基

參  考  價:1 - 560 /盒
具體成交價以合同協(xié)議為準
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    上海市

更新時間:2025-05-08 11:03:30瀏覽次數(shù):117次

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科研細胞
原代細胞
細胞培養(yǎng)
保存條件 -20℃、避光 貨號 GOY-XP3208
產(chǎn)品規(guī)格 100mL /500mL 用途 僅供科研實驗
人原代皮膚成纖維細胞專用培養(yǎng)基專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品:RBE 細胞專用培養(yǎng)基RSC96 細胞專用培養(yǎng)基GM12878 細胞專用培養(yǎng)基NK92 細胞專用培養(yǎng)基DRG 細胞專用培養(yǎng)基SW-13 細胞專用培養(yǎng)基CMT-93 細胞專用培養(yǎng)基KYSE-450 細胞專用培養(yǎng)基Panc08.13 細胞專用培養(yǎng)基TMD8 細胞專用培養(yǎng)基

人原代皮膚成纖維細胞專用培養(yǎng)基

產(chǎn)品介紹:

人原代皮膚成纖維細胞專用培養(yǎng)基 

由團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人原代皮膚成纖維細胞最佳的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含人原代皮膚成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用人原代皮膚成纖維細胞的培養(yǎng)。

規(guī)格

100mL/500mL

保存條件

-20℃、避光

貨號

GOY-XP3208

用途

僅供科研研究實驗

實驗報告:

人原代皮膚成纖維細胞專用培養(yǎng)基
一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

運輸和保存:

人原代皮膚成纖維細胞專用培養(yǎng)基

運輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法:按照對應(yīng)保存條件保存12個月,配置好的培養(yǎng)基2℃~8℃,保存2個月;

質(zhì)量控制:

人原代皮膚成纖維細胞專用培養(yǎng)基

注意事項:

人原代皮膚成纖維細胞專用培養(yǎng)基
1、收到產(chǎn)品請先檢查包裝是否完好,如有破損,漏液、渾濁等現(xiàn)象請及時聯(lián)系我們,培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響產(chǎn)品正常使用。

2、請仔細閱讀產(chǎn)品說明書,了解產(chǎn)品使用方法、保存方式、有效期等信息,若因操作失誤,保存不當(dāng)而導(dǎo)致產(chǎn)品出現(xiàn)污染等問題的,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3、本產(chǎn)品僅能用于科研,培養(yǎng)基中的一些組分對人體有較低的危害性,如有接觸立即用大量清水沖洗即可。

培養(yǎng)操作:

人原代皮膚成纖維細胞專用培養(yǎng)基
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

公司正在出售:
人原代皮膚成纖維細胞專用培養(yǎng)基


人淋巴細胞白血病細胞,A3細胞

RIN-m5f 細胞專用培養(yǎng)基

人卵巢癌細胞胞,CoC1細胞

NCI-H929 細胞專用培養(yǎng)基

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人卵巢癌細胞,A2780細胞

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人卵巢癌細胞,Caov3細胞

NCI-H660 細胞專用培養(yǎng)基

人卵巢癌細胞,HO-89細胞

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人卵巢癌細胞,OV-90細胞

RAMOS 細胞專用培養(yǎng)基

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-1

MHCC-97L 細胞專用培養(yǎng)基

人卵巢透明細胞癌細胞,ES-2細胞

人原代皮膚成纖維細胞專用培養(yǎng)基Karpas-299 細胞專用培養(yǎng)基

人卵巢腺癌細胞,OVCAR-3細胞

PtK1[NBL-3] 細胞專用培養(yǎng)基

人慢性骨髓性白血病細胞系,K562細胞

EOL-1 細胞專用培養(yǎng)基

人慢性粒細胞白血病細胞,KCL-22細胞

RBL-2H3 細胞專用培養(yǎng)基

人膜間皮細胞,MET-5A細胞

人淋巴母細胞,T2 (174xcem.T2 )細胞

 


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