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大鼠支氣管上皮細胞

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 11:14:03瀏覽次數:172次

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生化檢測試劑盒
科研細胞
原代細胞
細胞培養
貨號 GOY-01X0712
大鼠支氣管上皮細胞公司正在出售的產品:100g RNPVP K30 (聚乙烯咯烷酮K30) 常溫2 ug pEBFP-N1 pEBFP-N1 低溫運輸,-20℃保存CDC厭氧菌瓊脂 CDC Anaerobic Agar 250g25g 葡聚糖凝膠 LH-20 Sephadex LH-20 室溫保存50T 小反芻獸疫病毒PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。

產品名稱

大鼠支氣管上皮細胞

規格

5×10?Cells/T25培養瓶

分類

原代細胞

貨號

GOY-01X0712

商品介紹:

名稱 大鼠支氣管上皮細胞

2.組織來源:支氣管組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

大鼠支氣管上皮細胞分離自支氣管組織;支氣管(Bronchi),是指由氣管分出的各級分枝,由氣管分出的一級支氣管,即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較,前者較細長,走向傾斜;后者較粗短,走向較前者略直,所以經氣管墮入的異物多進入右主支氣管。支氣管和氣管還有以區別就是,氣管是以“C"型的氣管軟骨為支架,而支氣管不是。支氣管上皮是氣道與外界環境接觸的第一道防線,不僅是各種病原體、炎癥介質作用的靶細胞,還作為效應細胞合成、釋放多種炎性介質和細胞因子,從而參與氣道炎癥及免疫反應。支氣管上皮細胞在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺癌、肺囊性纖維化以及一些感染性呼吸道疾病的發病機制中均起著重要的作用。體外培養的原代支氣管上皮細胞因與體內組織在形態結構和功能活動上存在很大的相似性,因此,在基礎及臨床研究中極為重要。

5.方法簡介:

()實驗室分離的大鼠支氣管上皮細胞采用鏈霉-中性混合消化法結合機械刮刷并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

()實驗室分離的大鼠支氣管上皮細胞PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

包被條件鼠尾膠原2-5μg/cm2

培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產品貨號CM-R007

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態上皮細胞樣

傳代特性可傳1-2

消化液0.25%

培養條件氣相:空氣,95%CO25%

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;

4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

 

培養操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

重組小鼠 BMP-3b / GDF-10 蛋白 (Fc 標簽)

重組小鼠 GDF-8 / Myostatin / MSTN 蛋白 (Fc 標簽)

重組人 Noggin / NOG 蛋白 (His 標簽)

重組人 Inhibin beta B / INHBB / Activin B 蛋白 (His 標簽)

重組人 BMP-2 / BMP2A 蛋白

重組人 Latent TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白 (His 標簽)

重組人 GDF-15 蛋白 (Fc 標簽)

重組人 Lefty2 / Left

大鼠支氣管上皮細胞MSH2  錯配修復蛋白2抗體 規格: 0.1ml

CSP  環子孢子蛋白(約氏)抗體 規格: 1ml

KCNE2  鉀離子通道蛋白家族成員2抗體 規格: 0.2ml

5µg SUMO 蛋白 SUMO Protease -20℃保存

2 ug pAdTrack-CMV pAdTrack-CMV 低溫運輸,-20℃保存

YEP培養基 YEP Medium 250g

1g 鹽酸 Spectinomycindihydrochloride Pentahydrate 4℃保存

500mL Sodium Phosphate Buffer(鈉緩沖液),0.2M,pH7.5  Sodium Phosphate Buffer,0.2M,pH7.5  常溫保存

1.5mL DNA 非變性PAGE上樣液 DNA Native-PAGE Loading Buffer -20℃保存

10mL His標簽蛋白專用蛋白抑制劑 Protease Inhibitor for His-tagged Protein -20℃保存

50T 豬弓形蟲PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

20次 一站式MBP標簽蛋白純化套裝 One-Stop MBP-Tagged Protein Miniprep Pack 介質需4℃保存,PMSF需-20℃保存

 


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