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大鼠肺血管平滑肌細(xì)胞

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-16 09:59:23瀏覽次數(shù):199次

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原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
貨號(hào) GOY-01X0682
大鼠肺血管平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:1瓶 SMMC-7721細(xì)胞株 SMMC-7721 低溫運(yùn)輸和保存、志賀氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 100g DL- 蘋(píng)果酸 DL-Malic Acid 室溫保存50T 凋亡抑制蛋白Livin基因PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存1套 CN/DAB 底物套裝 CN/DAB -20℃避光保存

使用方法:

收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3. 細(xì)胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供最新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

產(chǎn)品名稱

大鼠肺血管平滑肌細(xì)胞

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

分類

原代細(xì)胞

貨號(hào)

GOY-01X0682

商品介紹:

名稱 大鼠肺血管平滑肌細(xì)胞

2.組織來(lái)源:肺組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

大鼠肺血管平滑肌細(xì)胞分離自肺組織;肺是機(jī)體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門(mén)戶,鼻為肺之外竅。肺血管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。肺血管平滑肌細(xì)胞主要功能:細(xì)胞表面表達(dá)介質(zhì)(ICAM-1VCAM-1)參與血管壁炎癥反應(yīng);是多數(shù)重要?jiǎng)用}疾病的靶細(xì)胞。肺血管平滑肌細(xì)胞與主要病生理變化:平滑肌增生易致肺動(dòng)脈高壓;先天性肺動(dòng)脈狹窄;肺動(dòng)脈栓塞。血管平滑肌細(xì)胞的加速生長(zhǎng)潛能是血管疾病進(jìn)展的關(guān)鍵因素,最新研究表明血管平滑肌細(xì)胞表達(dá)的ICAM-1VCAM-1能促進(jìn)血管壁的炎癥反應(yīng),并且與血管疾病的發(fā)展及穩(wěn)定性有關(guān)。

5.方法簡(jiǎn)介:

()實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肺血管平滑肌細(xì)胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

()實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肺血管平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、PenicillinStreptomycin

產(chǎn)品貨號(hào)CM-R002

換液頻率每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

傳代特性可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

培養(yǎng)操作:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

重組人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b)

重組人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組人 G-CSF / CSF3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組人 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白

大鼠肺血管平滑肌細(xì)胞CD20  CD20抗體 規(guī)格: 0.1mlMetallothionein 3  金屬硫蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

ECE1  內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化1抗體 規(guī)格: 0.1ml

membrane glycoprotein E(VZV)  人水痘帶狀皰疹毒gE蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

non-muscle Myosin IIA  非平滑肌肌球蛋白2A抗體 規(guī)格: 0.2ml

CCL4/MIP-1 Beta  巨噬細(xì)胞性蛋白1β抗體 規(guī)格: 0.1ml

5次 ECL法雜交檢測(cè)試劑盒  

2 ug pcDNA3.1/V6-His B pcDNA3.1/V6-His B 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

肝湯 Liver Broth 250g

30次 一站式長(zhǎng)效期SDS-PAGE電泳套裝 (適合2-30 kD蛋白) One-Stop Stable SDS-PAGE  Pack 4℃保存(上樣緩沖液需要-20℃保存)

50T 卡氏肺胞子蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

四環(huán)素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌、嗜熱菌芽孢檢驗(yàn)培養(yǎng)基  

500U 熱敏 Antarctic Phosphatase -20℃保存

 


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