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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第10年

18321818584

胸水:Calu-3

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-06 10:36:01瀏覽次數(shù):176次

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科研細(xì)胞
原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
貨號(hào) GOY-01X0054
胸水:Calu-3 公司正在出售的產(chǎn)品:100次 動(dòng)物細(xì)胞核蛋白微量制備試劑盒 Animal Nuclear Protein Miniprep Kit 4℃保存2 ug pSIREN-DsRed-Express pSIREN-DsRed-Express 低溫運(yùn)輸,-20℃保存25次 mRNA提取試劑盒 mRNA Isolation Kit 4℃保存2 ug pCMV-SPORT6 ANXA6 pC

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供最新價(jià)格、說(shuō)明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

產(chǎn)品名稱

胸水:Calu-3 

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

分類

細(xì)胞系

貨號(hào)

GOY-01X0054

商品介紹:

名稱 胸水:Calu-3 

別稱CaLu-3; CALU-3; Calu 3; Calu3; CALU3

種屬人類

年齡(性別)男性,25

組織來(lái)源未知

生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣

背景描述Calu-3細(xì)胞是從一名25歲的白人男性肺腺癌患者的胸水中分離建系的;該患者曾使用過(guò)環(huán)、、進(jìn)行治療。Calu-3細(xì)胞接種至裸鼠可成瘤;Calu-3細(xì)胞亦可作轉(zhuǎn)染宿主。

生物安全等級(jí)1

生長(zhǎng)培養(yǎng)基MEM10% FBS1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3/

倍增時(shí)間~35-45小時(shí)

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%CO25%

溫度:37℃

致瘤性Yes, forms well differentiated grade I adenocarcinoma in nude mice.

抗原表達(dá)情況Blood Type A; Rh+

基因表達(dá)情況Blood Type A; Rh+

注意事項(xiàng)該細(xì)胞較難消化,注意延長(zhǎng)消化時(shí)間,消化到細(xì)胞收縮變圓,輕拍培養(yǎng)瓶側(cè)邊,細(xì)胞可以滑落方可終止消化。

使用方法:

收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3. 細(xì)胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4) 待細(xì)胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

 

培養(yǎng)操作:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

大鼠 AKR1A1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 KRT19 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 EEF1G 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 MRPL28 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 RPS18 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 TNNC2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 HBB-B1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 ODAM 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 CD9 基因全長(zhǎng)ORF克隆

大鼠 TBPL1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

胸水:Calu-3 CD11b/c equivalent  CD11B/CD11C抗體 規(guī)格: 0.2ml

2 ug pET-43.1a(+) pET-43.1a(+) 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

A-1培養(yǎng)基 A-1 Medium 250g

250 nmol  Ionomycin(鈣離子載體) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

2 ug pQE-80L pQE-80L 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

25OD 3′-O-Me-m7G(5′)ppp(5′)G 帽結(jié)構(gòu)類似物 RNA Cap Structure Analogs -20℃保存

50次 DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)(φX174 DNA/Hinc Ⅱ) DNAMETER(3) 4℃保存

Rabbit Anti-horse IgM/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗馬IgM 規(guī)格: 0.1ml

5mg 彈性蛋白 Elastase 4℃保存

1瓶 CNE細(xì)胞株 CNE 低溫運(yùn)輸和保存

FGF11  成纖維細(xì)胞生因子11抗體 規(guī)格: 0.2ml

2 ug pEF1/myc-His B pEF1/myc-His B 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

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