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當前位置:上海谷研實業有限公司>>科研細胞>>細胞系>> 高轉移:AM

高轉移:AM

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產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-06 16:22:54瀏覽次數:158次

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科研菌種
生化檢測試劑盒
科研細胞
原代細胞
細胞培養
貨號 GOY-01X0254
高轉移:AM 公司正在出售的產品:2 ug pFBDM pFBDM 低溫運輸,-20℃保存卵黃氯化鈉瓊脂培養基 Egg-Yolk Salt Agar Base 250g1瓶 Caco-2細胞株 Caco-2 低溫運輸和保存50mL RNb-Mercaptoethanol (2) 常溫800U Bst DNA聚合,大片段 Bst DNA Polymerase,Large Frag. -20℃保存

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。

產品名稱

高轉移:AM 

規格

1×10?cells/T25培養瓶

分類

細胞系

貨號

GOY-01X0254

商品介紹:

名稱 高轉移:AM 

別稱AMR

生長特性貼壁細胞

細胞形態上皮細胞樣

生長培養基RPMI-164010% FBS1% P/S

推薦換液頻率2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養條件

氣相:空氣,95%CO25%

溫度:37℃

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;

4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

 

培養操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

Wnt-1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽

Wnt-1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽

Wnt-1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

BMP-4 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

ErbB4 / HER4 轉錄變體JM-a / CVT-2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽

PDCD1LG2 / PD-L2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽

DCN / Decorin 轉錄變體A

高轉移:AM 孟加拉紅培養基顆粒 Rose Bengal Medium 300ml/袋*10

10mL 膦酰二肽溶液,10mg/mL Phosphoramidon Solution -20℃保存

2 ug pJM17 pJM17 低溫運輸,-20℃保存

30%葡萄糖溶液(PH6.5±0.5) 30% Dextrose Broth 250g

200U ATP依賴的DNase ATP Dependent DNase -20℃保存

APLP2  淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2抗體 規格: 0.2ml

IL-10  白細胞介素-10抗體 規格: 0.1mlVimentin  波形蛋白抗體 規格: 0.1ml

CKIP-1  酪蛋白激2相互作用蛋白1抗體 規格: 0.2ml

FAM82A1  微管動力調節蛋白FAM82A抗體 規格: 0.2ml

phospho-RAD9(Ser387)  磷酸化細胞周期檢查控制蛋白質抗體 規格: 0.1ml

SYTL5/slp5  突觸樣蛋白5亞型2抗體 規格: 0.1mlUbe2B  泛素激活2B抗體 規格: 0.2ml

FAM156A/TMEM2  跨膜蛋白29抗體 規格: 0.2mlRabbit Anti-mouse IgG  兔抗小鼠IgG 規格: 1mg

 


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