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當前位置:上海谷研實業有限公司>>科研細胞>>原代紅胞>> 小鼠海綿體內皮細胞

小鼠海綿體內皮細胞

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-19 12:46:36瀏覽次數:201次

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科研抗體
科研菌種
生化檢測試劑盒
科研細胞
原代細胞
細胞培養
貨號 GOY-01X1208
小鼠海綿體內皮細胞公司正在出售的產品:GCLC/GCLM γ谷氨酰半合成抗體(γ-GCSc) 規格: 0.2ml
AMBP/Alpha 1 microglobulin α1微球蛋白抗體 規格: 0.2ml
E2F1 轉錄因子E2F-1抗體 規格: 0.1ml
TRAP220/MED1 甲狀受體相關蛋白220抗體 規格: 0.2ml
Mouse Anti-human IgG/Alexa Fl

公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。

產品名稱

小鼠海綿體內皮細胞

規格

5×10?Cells/T25培養瓶

分類

原代細胞

貨號

GOY-01X1208

商品介紹:

名稱 小鼠海綿體內皮細胞

2.組織來源:海綿體組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

小鼠海綿體內皮細胞分離自海綿體組織;陰莖海綿體是由海綿狀的小梁和腔隙構成的血竇結構,它主要包括海綿體內皮細胞、平滑肌細胞和成纖維細胞3種細胞成分。其中平滑肌細胞和成纖維細胞鑲嵌于海綿體細胞外基質的膠原中,而海綿體內皮細胞則覆蓋于海綿體血竇的腔面,僅占海綿體組織的2.8%。在消化海綿體組織時,膠原酶的作用主要是松解海綿體內皮細胞與基膜的聯系,破壞海綿體內皮細胞間的緊密連接。如果消化時間延長或膠原酶濃度過大,平滑肌細胞和成纖維細胞也將被消化下來,從而影響海綿體內皮細胞的純度。因此,比較篩選合適的膠原酶濃度和消化時間是成功分離海綿體內皮細胞的關鍵。

5.方法簡介:

()實驗室分離的小鼠海綿體內皮細胞采用混合酶消化法結合機械分離法、并用內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

()實驗室分離的小鼠海綿體內皮細胞CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

包被條件PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產品貨號CM-M173

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態內皮細胞樣

傳代特性可傳2-3

消化液0.25%

培養條件氣相:空氣,95%CO25%

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;

4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

 

培養操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

0.25mL GTP溶液,100mM GTP Solution -20℃保存

2 ug pLVX-PAmCherry-C1 pLVX-PAmCherry-C1 低溫運輸,-20℃保存

TM培養基 Thayer Martin Agar 250g

1瓶 PC-3細胞株 PC-3 低溫運輸和保存

濾膜腸球菌瓊脂 Filter Membrane Enterococcus Agar 250g

100g 矮壯素 Chlormequat 室溫保存

50T H5N1熒光定量PCR檢測試劑盒(不含反轉錄) H5N1 Bir?嵌?L?

小鼠海綿體內皮細胞Phospho-CDK2 (Thr160)  磷酸化周期素依賴性激2抗體 規格: 0.1mlMCPIP1  單核細胞趨化誘導蛋白1抗體 規格: 0.2ml

ATAD3A/B/C  三磷酸苷家族蛋白3A抗體 規格: 0.2ml

LEU5/RFP2  白相關蛋白5抗體 規格: 0.2ml

CEAcam8/CD67  胚抗原相關細胞粘附分子8抗體 規格: 0.2ml

Mel18/ZNF144  鋅指蛋白蛋白144抗體 規格: 0.2ml

ASMTY/HIOMT  松果體N甲基乙酰羥色胺抗體 規格: 0.2ml

G6PDH/H6PD  己糖6磷酸脫抗體 規格: 0.2mlSMN1  運動神經元生存蛋白1 規格: 0.1ml

phospho-BAD(Ser99)  磷酸化相關死亡促進因子抗體 規格: 0.1ml

50T 貓衣原體PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

20次 裂殖酵母化學感受態細胞制備試劑盒(含高效轉化液) S. pombe Chemical Competent Cell Preparation Kit 常溫

50 mg S-Methyl-ITU . sulfate(iN0S抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

乳糖膽鹽發酵培養基 Lactose Bile Broth 250g

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