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小鼠肝動脈內皮細胞

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 13:08:35瀏覽次數:169次

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科研菌種
生化檢測試劑盒
科研細胞
原代細胞
細胞培養
貨號 GOY-01X0818
小鼠肝動脈內皮細胞公司正在出售的產品:10%氯化鈉胰蛋白胨大豆肉湯 10% NaCl Trypticase Soy Broth 10ml*20支/包25µg Xa因子蛋白 Factor Xa Protease -20℃保存125mL RNase-Free TE Buffer(無RNase的TE緩沖液),pH7.6 RNase-Free TE Buffer,pH7.6 常溫保存1 管 MDS 4

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。

產品名稱

小鼠肝動脈內皮細胞

規格

5×10?Cells/T25培養瓶

分類

原代細胞

貨號

GOY-01X0818

商品介紹:

名稱 小鼠肝動脈內皮細胞

2.組織來源:肝動脈組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

小鼠肝動脈內皮細胞分離自肝動脈組織;在胚胎期,肝臟有3條動脈供血,分別來源于胃左動脈、腹腔動脈和腸系膜上動脈,這3條動脈分別的不同部位。出生后,一般保留一條動脈,大部分為起源于腹腔動脈的動脈,由其分出左、右肝動脈供應左、右半肝。偶爾也可見起源于胃左動脈的動脈或起源于腸系膜上動脈的動脈。但也有2條動脈并存的情況,如起源于腹腔動脈和起源于胃左動脈(25%),起源于腹腔動脈和起源于腸系臘上動脈(10%),而起源于胃左動脈和起源于腸系膜上動脈的2條動脈同時存在的情況比較少見。此外,還有5%像胚胎期一樣,3條動脈同時存在。這種起源于腹腔動脈以外的肝動脈稱為迷走肝動脈,如果肝臟沒有起源于腹腔動脈的動脈供血時,此種異位起源的肝動脈稱替代動脈,如果在常見肝動脈類型外,還有一支這種異位起始的動脈的一部分血流,這種肝動脈稱副肝動脈。肝動脈內皮細胞是襯于肝動脈內表面的單層扁平上皮,在炎癥時高表達黏附分子,與血流中白細胞表面黏附分子相互作用,從而介導白細胞穿越血管壁,亦屬一類非專職抗原提呈細胞。它們吞噬異物、細菌、壞死和衰老的組織,還參與集體免疫活動,包括:血管收縮及血管舒張,從而控制血壓;凝血(血栓形成及纖維蛋白溶解);動脈硬化;血管生成;炎癥及腫脹(浮腫);內皮細胞亦控制一些物質,如白血球進出血管。

5.方法簡介:

()實驗室分離的小鼠肝動脈內皮細胞采用混合酶消化法結合差速貼壁法,并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

()實驗室分離的小鼠肝動脈內皮細胞CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

包被條件PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產品貨號CM-M034

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態內皮細胞樣

傳代特性可傳2-3

消化液0.25%

培養條件氣相:空氣,95%CO25%

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;

4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

 

培養操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

MLCB寒天培地 MLCB Agar 250g 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Spondin-2

1g 姬姆色素染料 Giemsa Stain 室溫保存 62.5-4000 pg/mL 人Ⅹ型膠原α1(COL10α1)ELISA試劑盒

50T 霍亂弧菌01和0139CR檢測試劑盒   低溫運輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Citrate synthase, mitochondrial

300µL 山羊抗小鼠I

小鼠肝動脈內皮細胞phospho-NEK9(Thr210)  磷酸化/蛋白激NEK9抗體 規格: 0.1ml

LDHC/Cancer,testis antigen 32  酸脫LDH-C(瘤/睪抗原32)抗體 規格: 0.1ml

麥康凱肌醇阿東醇羧卞瓊脂(MZAC) MZAC Agar 100g

25g L-  L-Tyrosine 室溫避光保存

50mL Sodium Orthovanadate Solution(正釩酸鈉溶液),100mM Sodium Orthovanadate Solution,100mM 常溫保存

10mL miRNA尿素-PAGE上樣液,6× miRNAoN -20℃保存

1瓶 SK-NEP-1細胞株 SK-NEP-1 低溫運輸和保存

50T 豬丹毒桿菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

100次 植物總蛋白質微量提取試劑 (3DE) Plant Total Protein Miniprep Kit (3DE) 常溫保存

2 ug pGEX-5X-1 pGEX-5X-1 低溫運輸,-20℃保存

100U PreScissiom 蛋白 PreScissiom Protease -20℃保存

25OD G(5′)ppp(5′)A 帽結構類似物 RNA Cap Structure Analogs -20℃保存

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