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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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淀粉脫分支酶(DBE)可見(jiàn)分光光度法

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-04-27 11:50:11瀏覽次數(shù):282次

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科研細(xì)胞
原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
貨號(hào) GOY-01S6692
淀粉脫分支酶(DBE)可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:RNA清除試劑盒 100次
樹(shù)脂法去內(nèi)試劑盒 20次
液相法去內(nèi)試劑盒 20次
沉淀法去內(nèi)試劑盒 20次
藍(lán)藻A+ 培養(yǎng)液 500毫升
藍(lán)藻B-HEPES培養(yǎng)液 500毫升
小量藍(lán)藻基因組DNA氯化銫萃取試劑盒 20次
大量藍(lán)藻基因組DNA氯化銫萃取試劑盒 5次
藍(lán)藻甲磺酸乙脂突變誘導(dǎo)試劑盒 10次
小量微藻基因組

28.png

商品屬性:

產(chǎn)品名稱

淀粉脫分支酶(DBE)可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒

規(guī)格

50管/24樣

檢測(cè)方法

可見(jiàn)分光光度法

貨號(hào)

GOY-01S6692

商品介紹:

測(cè)定意義

DBE能夠?qū)R恍缘亓呀庵ф湹矸鄣摩?1,6糖苷鍵,產(chǎn)生線性的葡萄糖鏈,在調(diào)整支鏈淀粉分子的鏈長(zhǎng)方面有重要的作用。

測(cè)定原理

采用3,5-二硝基水楊酸法測(cè)定DBE催化支鏈淀粉產(chǎn)生的還原糖,通過(guò)測(cè)定還原糖含量的變化來(lái)計(jì)算DBE活性。

需自備的的儀器和用品

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg1克瓶裝,每瓶140000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血35ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔510分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置12小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

人縮Bacillus coagulans色素P4502E1檢測(cè)試劑盒

L-乳酸脫氫Bacillus coagulans色素P450c21A;21-羥化檢測(cè)試劑盒

人酸性神經(jīng)鞘磷脂Bacillus coagulans外基質(zhì)金屬蛋白誘導(dǎo)因子檢測(cè)試劑盒

人花生四烯酸5脂加氧Bacillus coagulans外基質(zhì)糖蛋白檢測(cè)試劑盒

5脂加氧Bacillus cohnii外信號(hào)調(diào)節(jié)激檢測(cè)試劑盒

人腺苷酸環(huán)化1Paenibacillus ehimensis外信號(hào)調(diào)節(jié)激檢測(cè)試劑盒

人可溶性腺苷酸環(huán)化Bacillus diffusus纖維連接蛋白檢測(cè)試劑盒

人脫羧Bacillus firmus因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1檢測(cè)試劑盒

淀粉脫分支酶(DBE)可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒小鼠解整合素樣金屬蛋白8(ADAM8)免疫試劑盒*直銷

大鼠白介素1β(IL-1β)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

小鼠血栓前體蛋白(TpP)免疫試劑盒*直銷

大鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)免疫試劑盒*直銷

基質(zhì)金屬蛋白5(MMP-5)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

大鼠金屬硫蛋白(MT)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

大鼠孕酮受體(PROGR)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

抗卵巢抗體(AOAb)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

甘肽過(guò)氧化(GSH-Px)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。


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