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超氧陰離子清除能力可見分光光度法

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-24 16:06:51瀏覽次數:172次

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貨號 GOY-01S6461
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【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

超氧陰離子清除能力可見分光光度法

50管/48樣

可見分光光度法

GOY-01S6461

商品介紹

測定意義

超氧陰離子自由基作為生物體代謝過程中產生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質、蛋白質、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細胞結構和功能的破壞,與機體衰老和病變有很密切的關系,清除超氧陰離子自由基的研究已經得到了廣泛的關注。

測定原理:

AP-TEMED系統產生超氧陰離子,與鹽酸羥胺反應生成NO2-,NO2-與對氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物,在530nm處有特征吸收峰,樣品對超氧陰離子的清除能力與530nm的吸光值呈負相關。

自備實驗用品及儀器:

天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
QQ截圖20220307153443.png

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

① 組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取

② 細菌/細胞樣本:

先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10

4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;

2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般

將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通常可以使測定正常。

血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa抗體Human RPS19(Ribosomal protein S19) ELISA Kit

白介素17受體C抗體Human RPS20 ELISA Kit

球蛋超家族成員8抗體Human RPP21 ELISA Kit松塔

白介素33抗體Human RPLP0 ELISA Kit肉桂

核蛋白9抗體(Ran結合蛋白M)Human RPP38 ELISA Kit亞鈣

真核翻譯起始因子3A抗體Human RPP25 ELISA Kit雜質A(2-甲基-4(5)-硝基咪唑

化真核翻譯起始因子4G抗體Human RPRD1B ELISA Kit

整合素α4β7抗體Human RPL7L1 ELISA Kit雙硫化物

超氧陰離子清除能力可見分光光度法氧化鈣 99.99% metals basisAnti-Integrin Alpha2b/CD41/FITC  熒光素標記血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa抗體IgG雞中心體蛋白110(CEP110)聯免疫吸附測定試劑盒

硫化鎘 CP,95%Anti-Integrin Alpha3/FITC  熒光素標記整合素α3抗體IgG雞生長分化因子2(GDF2)聯免疫吸附測定試劑盒

硫化鎘 AR,98%Anti-Integrin Alpha3 Beta1/FITC  熒光素標記整合素α3β1抗體IgG雞神經鈣黏蛋白(NCAD)聯免疫吸附測定試劑盒

硫化鎘 99.999%Anti-Integrin a7/FITC  熒光素標記整合素α7抗體IgG雞δ樣蛋白1同源物(DLK-1)聯免疫吸附測定試劑盒

化鈰,無水 99.9% (REO)Anti-Integrin AlphaE2/CD103 /FITC  熒光素標記整合素αE2抗體IgG雞干因子(SCF)聯免疫吸附測定試劑盒

銅粒 99.99% metals basis,粒徑<5mmanti-Integrin alpha E2 /FITC  熒光素標記整合素alpha E2 抗體IgG雞受體(TR)聯免疫吸附測定試劑盒

銅粉  99.8% metals basis,20μmAnti-Integrin AlphaM/CD11b /FITC  熒光素標記巨噬表面分子/整合素-α2抗體IgG雞鈣腔蛋白(CALU)聯免疫吸附測定試劑盒

硝銫 99.99%Anti-Integrin avb3/FITC  熒光素標記整合素avb3抗體IgG雞二肽肽IV (DPP4)聯免疫吸附測定試劑盒

硝銫 AR,99.0%Anti-Integrin AlphaV Beta5/FITC  熒光素標記整合素αVβ5抗體IgG雞超氧化物歧化1(SOD1)聯免疫吸附測定試劑盒

氧化鈰 99.9% metals basis,黃色Anti-Integrin Beta5/FITC  熒光素標記整合素β5抗體IgG雞α1-B-糖蛋白(α1BG)聯免疫吸附測定試劑盒

氧化鈰 20nm 球形,99.5%Anti-IQGAP1/FITC  熒光素標記支架蛋白抗體IgG雞尿嘧核苷化2(UPP2)聯免疫吸附測定試劑盒

氧化鈰 99.95% metals basis ,白色Anti-Phospho-IRAK1 (Ser376) /FITC  熒光素標記化白介素-1受體相關激1抗體IgG雞胎球蛋白A(FETUA)聯免疫吸附測定試劑盒

氧化鈰 99.95% metals basis,<50 nm (BET)Anti-Phospho-IRAK1 (Thr209) /FITC  熒光素標記化白介素-1受體相關激1抗體IgG雞脂A1(PLA1)聯免疫吸附測定試劑盒

氧化鈰 99.9% metals basis,<100 nm (BET)Anti-Phospho-IRAK1 (Thr387) /FITC  熒光素標記化白介素-1受體相關激1抗體IgG雞抗原提呈相關轉運蛋白(TAP)聯免疫吸附測定試劑盒

氧化鈰 99.99%Anti-IRAK 2/FITC  熒光素標記白介素-1受體相關激2抗體IgG雞核轉錄因子Y亞γ(NFYC)聯免疫吸附測定試劑盒

測定步驟:

1、 酶標儀預熱30min以上,調節波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。


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