實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

產品屬性：

產品介紹：

名稱    大鼠胎盤絨毛膜滋養層細胞

2.組織來源：胎盤組織

3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介：

大鼠胎盤絨毛膜滋養層細胞分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內膜聯合長成的母子間交換物質的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發育，依靠胎盤從母體取得營養，而雙方保持相當的獨立性。胎盤還產生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合，以達到母子間物質的交換，這樣的結構稱假胎盤。絨毛膜是由滋養層和胚外中胚層的壁層構成。胚泡植入子宮內膜后，在胚泡表面形成許多絨毛樣的突起，以細胞滋養層為中軸，外裹合體滋養層，稱初級干絨毛。胚外中胚層長入初級干絨毛的中軸，使初級干絨毛變成了次級干絨毛。當絨毛膜的胚外中胚層內形成血管網和結締組織，并與胚體內的血管相通時，次級干絨毛改稱三級干絨毛。三級干絨毛末端的細胞滋養層細胞形成細胞滋養層殼。隨著胚胎發育，叢密絨毛膜與基蛻膜共同構成了胎盤，而平滑絨毛膜則和包蛻膜一起逐漸與壁蛻膜融合。

5.方法簡介：

()實驗室分離的大鼠胎盤絨毛膜滋養層細胞采用-DNA酶聯合消化法結合密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：

()實驗室分離的大鼠胎盤絨毛膜滋養層細胞經Cytokeratin-7免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息：

包被條件PLL（0.1mg/ml）

培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產品貨號CM-R182

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態梭形、多角形

傳代特性可傳1-2代

消化液0.25%

培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養箱中預溫3-4小時后再做處理，以穩定細胞狀態。

3. 預熱培養基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養基。放到37度培養箱培養。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規定程序處理。

細胞培養的優點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

1瓶 COS-7 [COS7]細胞株 COS-7 [COS7] 低溫運輸和保存

牛津瓊脂（OXA）平板（9cm） Oxford Agar Base 10個/包

200U T4聚核苷酸激 T4 Polynucleotide Kinase -20℃保存

100mL PIPES Buffer，0.5M, pH8.0  PIPES Buffer，0.5M, pH8.0  常溫保存

100mL YPDG液體培養基 YPG Liquid Medium 常溫

2 ug pPIC9k-His pPIC9k-His 低溫運?嵌?L?

大鼠胎盤絨毛膜滋養層細胞C19orf24  19號染色體開放閱讀框24抗體 規格: 0.2mlPGGT1B/FNTB  蛋白香葉烯基轉移1β（FTβ）抗體 規格: 0.2ml

HSP70/HSPA1A  熱休克蛋白-70抗體 規格: 0.1ml

CRLR/CGRPR1  降鈣素基因相關肽1型受體抗體 規格: 0.1ml

Goat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的羊抗兔IgG 規格: 0.1ml

Proteasome 20S alpha + beta  蛋白體PSMα+β抗體 規格: 0.2ml

2 ug pcDNA4/TO/Myc-His B pcDNA4/TO/Myc-His B 低溫運輸，-20℃保存

Cryopyrin/CIAS1/NALP3  細胞凋亡誘導蛋白NALP3抗體 規格: 0.1mlGoat Anti-Chicken IgG/HRP  辣根過氧化物標記的羊抗雞IgG 規格: 0.1ml

1mL Tricine-SDS-PAGE上樣液 Tricine-SDS-PAGE Loading Buffer -20℃保存

CIN-1培養基基礎 Cepulodin Irgasan Novobiocin Agar 250g

肝肉瓊脂培養基  250g

100mL AMP Buffer，0.5M，pH9.0  AMP Buffer，0.5M，pH9.0  常溫保存

2 ug RCIscript-GoldyTALEN RCIscript-GoldyTALEN 低溫運輸，-20℃保存