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秋行軍蟲(chóng)卵巢細(xì)胞Sf9克隆株操作步驟

時(shí)間:2022/10/12閱讀:255
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秋行軍蟲(chóng)卵巢細(xì)胞Sf9克隆株操作步驟:

1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量yi酶,使yi酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去yi酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止yi酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。

2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

重組食蟹猴 XCL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a, His 標(biāo)簽)

重組人 XCL2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 46-113, His 標(biāo)簽)

重組人 XCL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組大鼠 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組小鼠 XCL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白

重組人 CCL11 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組小鼠 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (aa 28-93, His 標(biāo)簽)

重組小鼠 CCL17 / TARC 蛋白

重組人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

重組人 CCL21 / 6Ckine 蛋白

重組人 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白

重組小鼠 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白

重組食蟹猴 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

重組人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & NusA 標(biāo)簽)


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