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阿留申病病毒探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)過程

時(shí)間:2022/9/27閱讀:696
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阿留申病病毒探針法熒光PCR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)過程:

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

二、操作步驟

1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。

    10×PCR buffer             5μl

      dNTP mixl                 4μl

      引物1(10pM)               2μl

      引物2(10PM)              2μ

      Taq酶(2U/μl)            1μl

      DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl

      加ddH2O至               50 μl

   視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。

2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。

3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)

alpha 1 Fetoprotein甲胎蛋白抗體

ATM毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體

ABCF2ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體

ABLIM3肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白LIM蛋白3抗體

Acidic Calponin酸性鈣調(diào)蛋白3抗體

phospho-ADAM17 (Thr735)磷酸化CD156b抗體

ADH5乙醇脫氫酶5抗體

ADH6乙醇脫氫酶6抗體

AGPAT5溶血磷脂酰基轉(zhuǎn)移酶5抗體

AIPL1遺傳性失明相關(guān)蛋白AIPL1抗體

AIRE免疫調(diào)節(jié)蛋白AIRE抗體

phospho-AKT1 (Ser473)磷酸化蛋白激酶AKT1抗體

phospho-AKT1 (Thr72)磷酸化蛋白激酶AKT1抗體

phospho-AKT1 (Tyr326)磷酸化蛋白激酶AKT1抗體

ALDH1A2乙醛脫氫酶2型抗體

ALDH9A1γ-氨基丁酸醛脫氫酶抗體

AGPS衰老相關(guān)蛋白5抗體

phospho-alpha B Crystallin (Ser59)磷酸化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體

AMBN釉基質(zhì)蛋白抗體

phospho-AMPK alpha 2 (Ser176)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體

phospho-AMPK alpha 2 (Ser491)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體

phospho-Androgen Receptor (Ser515)磷酸化雄激素受體抗體

phospho-Androgen Receptor (Ser791)磷酸化雄激素受體抗體

phospho-Androgen Receptor (Ser94)磷酸化雄激素受體抗體


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