小尾寒羊瘦素(LEP)ELISA檢測試劑盒洗滌方法：

1. 自動洗板機：每孔加入洗滌液350μl，注入與吸出間隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板：甩盡孔內液體，在潔凈的吸水紙上拍干，每孔加洗滌液350μl，浸泡1-2分鐘，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體，在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫；試劑或樣品配制時，均需充分混勻，并盡量避免起泡。

1.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣時將樣品加于酶標板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜，37℃孵育2小時。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.棄去液體，甩干，每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內配制)，酶標板加上覆膜，37℃溫育1小時。

3.棄去孔內液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約350μl /每孔，甩干并在吸水紙上輕拍將孔內液體拍干。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內配制)100μl，加上覆膜，37℃溫育1小時。

5.棄去孔內液體，甩干，洗板5次，方法同步驟3。

6.每孔加底物溶液100μl，酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據實際顯色情況酌情縮短或延長，但不可超過30分鐘。當標準孔出現明顯梯度時，即可終止)。

7.每孔加終止液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。

8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開酶標儀電源，預熱儀器，設置好檢測程序。

9.實驗完畢后將未用完的試劑按規定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束。

小鼠細胞毒性T淋巴細胞相關抗原4 (mouse CTLA-4)

小鼠細胞色素P450(mouse Cytochrome P450)

小鼠C反應蛋白(mouse CRP)

小鼠CXC趨化因子受體3(mouse CXCR3)

小鼠CXC趨化因子配體16(mouse CXCL16)

小鼠CXCL1/KC(mouse KC)

小鼠環磷酸腺苷(mouse cAMP)

小鼠環磷酸鳥苷(mouse cGMP)

小鼠睫狀神經營養因子(mouse CNTF)

小鼠可溶性CD36分子(mouse sCD36)

小鼠sCD40配體(mouse sCD40 Ligand)

小鼠CD34(mouse CD34)

小鼠可溶性白細胞分化抗原40配體(mouse sCD40L)

小鼠補體C3a(mouse C3a)

小鼠補體C5a(mouse C5a)

小鼠血清總補體(mouse CH50)

小鼠肌酸激酶(mouse CK)

小鼠肌酸激酶同工酶(mouse CK-MB)

小鼠羥甲基賴氨酸(mouse CML)

小鼠C-肽(mouse C-peptide)

小鼠心肌鈣蛋白T(mouse cTnT)

小鼠粒細胞集落刺激因子(mouse G-CSF)

小鼠粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(mouse GM-CSF)

小鼠巨噬細胞集落刺激因子(mouse M-CSF)

小鼠細胞色素C(mouse Cytochrome C)

小鼠雙鏈DNA(mouse dsDNA)

小鼠多巴胺(mouse Dopamine)

小鼠二胺氧化酶(mouse DAO)

小鼠D-二聚體(mouse D-Dimer)

小鼠二肽基肽酶Ⅳ(mouse DPP4)

小鼠β內啡肽(mouse β-EP)

小鼠表皮生長因子(mouse EGF)

小鼠表皮生長因子受體(mouse EGF R)

小鼠內皮素-1(mouse Endothelin-1)

小鼠噬酸性粒細胞趨化因子(mouse Eotaxin)

小鼠促紅細胞生成素(mouse EPO)

小鼠紅細胞生成素受體(mouse EPOR)

小鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(mouse ECP)

小鼠上皮中性粒細胞活化肽-78(mouse ENA-78)

小鼠血管內皮抑素(mouse Endostatin)

小鼠腎上腺素(mouse EPI)

小鼠內皮細胞一氧化氮合酶(mouse eNOS)