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TSZelisa試劑盒如何對細胞組分進行分級分離

時間:2017/8/24閱讀:400
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TSZelisa試劑盒如何對細胞進行分級分離取決于很多因素,包括哪些儀器、知識可以利用,您想要分離什么,以及這些組分的下游應(yīng)用是什么。

離心是細胞分級分離中常用的技術(shù)之一,它們單獨使用,或與其他方法結(jié)合。例如,對于高爾基體或過氧化物酶體,大部分操作都要求高速的密度梯度離心。然而,O’Hara Noonan也指出,超速離心也有一些缺點,包括超速離心機是高價的儀器,有些實驗室無法接觸到。另外,密度梯度難以傾倒是出了名的,其結(jié)果是技術(shù)依賴的。

當然,其他的許多組分也可以只利用試劑和臺式儀器來富集。供應(yīng)商開發(fā)出一些試劑盒,能方便快捷地帶來高度富集的細胞組分。賽默飛世爾全新設(shè)計的Mem-PER Plus試劑盒,能在一小時之內(nèi)富集完整的膜相關(guān)蛋白。

據(jù)sigma-aldrich的產(chǎn)品專家Michael Moehlenbrock介紹,這類試劑盒的原理在很大程度上是類似的。它們往往使用低滲緩沖液給細胞膜帶來壓力,然后用等滲的提取緩沖液(帶或不帶還原劑和蛋白酶抑制劑)來維持感興趣的細胞器。有時也需要機械裂解或去污劑裂解。“各個不同供應(yīng)商在細胞分級分離試劑盒的設(shè)計上都是一致的,而不同細胞組分的差異在于緩沖液組成、裂解試劑和離心速度,”Moehlenbrock說。

此類試劑盒的價值并不在于某些秘密試劑,而在于QC系統(tǒng)的一致性和重復性。“細胞分級分離的方法已經(jīng)過充分鑒定,其操作步驟適用于大部分應(yīng)用,”Moehlenbrock說。“商業(yè)化試劑盒為終用戶帶來了簡便和效率,同時提供了*的安全性。”

通過改變穿插在離心步驟之間的緩沖液的去污劑組分,研究人員可分離不止一個組分。例如,市場上許多試劑盒可收集細胞核和胞漿蛋白。其他試劑盒也帶來了三個或四個不同的組分。Cell Signaling Technology的Cell Fractionation Kit產(chǎn)生了細胞質(zhì)、細胞膜/細胞器以及細胞核/細胞骨架組分,而QIAGEN的Qproteome Cell Compartment Kit分離出細胞質(zhì)、細胞膜、細胞核和細胞骨架組分。

美天旎提供一種不含去污劑的試劑盒,TSZelisa試劑盒利用TOM22抗體標記的磁珠來特異分離線粒體。據(jù)該公司的介紹,他們不提供其他亞細胞組分的產(chǎn)品,但客戶可以利用自己的抗體來間接分離其他組分。

同樣地,賽默飛世爾的Cell Surface Protein Isolation Kit標記細胞表面蛋白的外部賴氨酸,它具有一個可切割的生物素衍生物,讓此蛋白組分在細胞裂解后可被捕獲。
(S)-(+)-3-甲基-1-戊醇(>98.0%(GC))    英文名稱:    (S)-(+)-3-Methyl-1-pentanol    質(zhì)量規(guī)格:    >98.0%(GC)            號:    42072-39-9    
(S)-(+)-3-羥基丁酸甲酯(>98.0%(GC))    英文名稱:    Methyl (S)-(+)-3-Hydroxybutyrate    質(zhì)量規(guī)格:    >98.0%(GC)            號:    53562-86-0    
(S)-(+)-4-甲基-1-己醇(>98.0%(GC))    英文名稱:    (S)-(+)-4-Methyl-1-hexanol    質(zhì)量規(guī)格:    >98.0%(GC)            號:    1767-46-0    
(S)-(+)-5-甲基-1-庚醇(>96.0%(GC))    英文名稱:    (S)-(+)-5-Methyl-1-heptanol    質(zhì)量規(guī)格:    >96.0%(GC)            號:    57803-73-3    
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