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小鼠分泌型免疫球蛋白AElisa Kit圖片

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具體成交價以合同協議為準

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所  在  地上海市

更新時間:2019-03-19 16:09:19瀏覽次數:200次

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產地 進口 加工定制
適用領域 科研
樣本保存:請盡早檢測,2-8℃保存一天;需更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存。如需周期收集樣本,請將樣本及時分裝標號后,置-20℃或-70℃保存;3、請提前告訴我們:小鼠分泌型免疫球蛋白AElisa Kit圖片說明書樣本的種屬、樣本數量、待測指標及其他特殊要求。

試劑配制:
1、小鼠分泌型免疫球蛋白AElisa Kit圖片酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

產品名稱

英文名稱

規格

小鼠分泌型免疫球蛋白AElisa Kit圖片

 Mouse Secretory immunoglobulin A,sIgA ELISA Kit

48T/96T

小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)Elisa KitMouse Secretory immunoglobulin A,sIgA ELISA Kit
小鼠分泌型免疫球蛋白AElisa Kit圖片【實驗用途】分泌型免疫球蛋白A(Secretory immunoglobulin A,sIgA)是Chodircker和Tomas等在60年代初首先在人外分泌液中發現的一種IgA類抗體,它與血清中IgA無論在理化性質或免疫學性質上均不相同。sIgA 是黏膜免疫系統的主要效應分子,主要存在于淚液、唾液、汁和呼吸道、消化道及泌尿生道等黏膜表面分泌液中。粘膜的表面存在著分泌性免疫(Secretory immunity),而粘膜表面的IgA提供了*道免疫防線。sIgA是粘膜組織免疫應答的特征,sIgA抗體可通過阻礙粘膜與細菌和病毒的接觸從而給粘膜表面提供特殊的免疫屏障。胃腸道是sIgA的中樞器官。sIgA是機體內分泌量多的免疫球蛋白,分泌量可達30~100 mg/(d•kg)。slgA是多聚體,因此它能和病毒、細菌、寄生蟲或它們的毒素交叉連接而形成一個大分子的復合物。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經生物素(biotin)標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應;經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。

 


操作步驟:
1)小鼠分泌型免疫球蛋白AElisa Kit圖片運用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發生很多的泡沫,防止加樣時參加很多的氣泡,發生加樣上的差錯。
2)依據待測樣品數量加上規范品的數量決議所需的板條數。每個規范品和空白孔主張做復孔。每個樣品依據自個的數量來定,能運用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內。
3)參加稀釋好后的規范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內。當即參加50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應當即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。
注意事項:
1加樣:
小鼠分泌型免疫球蛋白AElisa Kit圖片實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”,因此盡量采用水?。?/span>
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復合物脫離;
②洗板機洗板時應經常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數;
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結果要在15-30 min內完成,定性測定用肉眼判讀試驗結果時,反應板應水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結果,酶標儀不應置于陽光或強光照射下,需先預熱15-30 min再進行測試。
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