免疫熒光技術的實驗步驟：
一、準備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，十分鐘后棄去，使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其*覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內，保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
詳細介紹：

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抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。產品僅用于科研保存前需經除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習性：
(1)結合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區別，就在于抗體能與相應抗原發生特異性結合，在體內導致生理或病理效應;在體外產生各種直接或間接的可見的抗原抗體結合反應。抗體是靠其分子上的特殊的結合部位與抗原結合的。
(2)激活補體：抗體與相應抗原結合后，借助暴露的補體結合點去激活補體系統、激發補體的溶菌、溶細胞等免疫作用。
(3)結合細胞：不同類別的免疫球蛋白，可結合不同種的細胞，產生不同的疚，參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質，也具有刺激機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質，均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經透析法將其純化。
李氏菌增菌肉湯（LB1，LB2）基礎小膠質細胞培養基肺大動脈內皮細胞HCV-NS4a  丙型肝炎病毒-NS4a（抗原）

七葉苷培養基成纖維細胞培養基肺大動脈平滑肌細胞HEV  戊型肝炎病毒（抗原）

半固體動力培養基成纖維細胞培養基肺大靜脈內皮細胞HGV(Hepatitis G vivus)  庚型肝炎病毒（抗原）

牛津瓊脂（OXA）基礎成纖維細胞培養基肺大靜脈平滑肌細胞HisX6  聚組氨酸標簽蛋白

PALCAM培養基基礎成纖維細胞培養基-2肺動脈成纖維細胞HIV gp120  艾滋病病毒（抗原）

Fraser肉湯基礎扁桃體上皮細胞培養基肺泡上皮細胞HSP-60( Heat shock protein-60)  熱休克蛋白-60（抗原）

FB1/Half Fraser配套試劑(吖啶黃素、萘啶酮酸、檸檬酸鐵銨、氯化鋰)口腔角質細胞培養基氣管上皮細胞HSP-70 peptide  熱休克蛋白-70（多肽抗原）

Fraser配套試劑(吖啶黃素、萘啶酮酸、檸檬酸鐵銨、氯化鋰)肺泡上皮細胞培養基支氣管上皮細胞alpha Adaptin/AP1  銜接蛋白α抗原

GR /FITC  熒光素標記糖皮質激素受體IgG卷曲螺旋結構域蛋白721,12-二溴十二烷Rat PC4 (Positive Cofactor 4) 檢測試劑盒

GPNMB/Osteoactivin/FITC  熒光素標記GPNMBIgG卷曲螺旋結構域蛋白73三氟甲磺酸鋰Rat PA/PLB (Pre-Albumin) 檢測試劑盒

Phospho-Glucocorticoid Receptor (Ser211) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化糖皮質激素受體IgG卷曲螺旋結構域蛋白74B三氟甲磺酸鋰Rat FXI (Coagulation Factor XI) 檢測試劑盒

GRB2/ASH /FITC  熒光素標記生長因子受體結合蛋白2IgG19號染色體開放閱讀框25(S)-(+)-3-氨基哌啶Rat PRO-ANP (Pro Atrial Natriuretic Peptide) 檢測試劑盒

GPR109A/HM74A/FITC  熒光素標記G蛋白偶聯受體109AIgG19號染色體開放閱讀框42(S)-(+)-3-氨基哌啶Rat PCT (Procalcitonin) 檢測試劑盒

GRB10/FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠生長因子受體結合蛋白10IgG19號染色體開放閱讀框44(S)-(+)-3-氨基哌啶Rat PINP (Procollagen I N-Terminal Peptide) 檢測試劑盒

Phospho-GRB10 (Tyr67) /FITC  熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化生長因子受體結合蛋白10IgG19號染色體開放閱讀框48(R)-(-)-3-氨基哌啶 Rat PⅢNT (Procollagen Ⅲ N-Terminal Peptide)檢測試劑盒

GrB(Granzyme B)(AA 18-29)/FITC  熒光素標記顆粒酶BIgG19號染色體開放閱讀框50(R)-(-)-3-氨基哌啶 Rat PIIINP (N-Terminal Procollagen Ⅲ Propeptide) 檢測試劑盒
α-s1酪蛋白抗體總狀共頭霉Mouse NT-4 (Neurotrophin 4)  Kit

Xanthomonas gardneriMouse NAP3 (Neutrophil Activating Protein 3)  Kit  

類干酪乳桿類干酪亞種Mouse NAP-2 (Neutrophil Activating Protein-2)  Kit

蠟狀芽孢桿Mouse NGAL (Neutrophil Gatinase Associated Lipocalin)  Kit

煙曲霉Mouse (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1)  Kit  

禽勞斯肉瘤病毒Mouse NOX4 (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 4)  Kit  

產氣莢膜梭       毒素C型Mouse NADPH (Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate)  Kit

木霉Mouse NT-proBNP (N-terminal pro-Brain Natriuretic Peptide)  Kit