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實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合,直接發揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,參與免疫應答。
(4)產品僅用于科研可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
20號染色體開放閱讀框106抗體 | C20orf106 | BJ-K8160 |
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產生出的化學性質單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學性質單一,特異性強,靈敏度高。
3.單克隆抗體的應用:
(1)診斷疾病:診斷病毒引起的疾病和用癌細胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細胞:與培養好的骨髓瘤細胞混合,人工誘導細胞融合。
3.細胞融合:淋巴細胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細胞的篩選:HAT選擇培養基篩選出雜交瘤細胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養基,其中三種成分與細胞DNA合成有關,骨髓瘤細胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養雜交瘤細胞:體外培養雜交瘤細胞,從培養液中分離提取單克隆抗體。或者,將雜交瘤細胞移植到小鼠腹腔內,從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化?
多克隆抗體定制:
當機體受到抗原刺激后, 產生免疫學反應,由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應、沉淀反應等優點,產品僅用于科研被廣泛應用于免疫學診斷領域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體,結合并增強巨噬細胞的吞噬功能(調理作用和 ADCC 效應),穿過胎盤,保護胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內受感染后早產生的抗體,具有很強的激活補體和調理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細胞表面,是 B 細胞識別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過敏性體質的人血清中可檢測到,參與介導 I 型超敏反應和抗寄生蟲感染。
Tryptic Soy Broth (Soybean-Casein Digest Medium)人羊膜上皮細胞總RNAN-(5-氨基-2-基)-4-(3-吡啶基)-2-氨基嘧啶GAPDH 3-磷酸甘油醛脫氫酶(人)抗原
胰蛋白大豆瓊脂人滋養層絨毛細胞總RNAN-(5-氨基-2-基)-4-(3-吡啶基)-2-氨基嘧啶CXCR3/CD183 peptide 細胞表面趨化因子受體3抗原
Tryptic Soy Agar (Soybean-Casein Digest Agar Medium)人絨毛間葉成纖維細胞總RNAN-(5-氨基-2-基)-4-(3-吡啶基)-2-氨基嘧啶GATA-3(GATA binding factor 3) GATA結合蛋白3抗原
馬鈴薯葡萄糖瓊脂人前脂肪細胞-內臟總RNA鹽酸奈必洛爾GATA-4(GATA binding factor 4) GATA結合蛋白4抗原
Potato Dextrose Agar人前脂肪細胞-皮下總RNAFmoc-N-甲基-L-天冬氨酸 4-叔丁酯Gax(growth arrest-specific homeobox) 生長終止特異性同源盒基因抗原
磷酸緩沖液pH7.2人間充質干細胞-骨髓總RNAN-叔丁氧羰基-O-芐基-L-蘇氨酸GDF8/MS(growth differiation factor 8) 生長分化因子8抗原
Phosphate Buffer, pH 7.2人間充質干細胞-脂肪總RNAN-叔丁氧羰基-O-芐基-L-蘇氨酸GDNF (Glial cell line-derived neurotrphic factor) 膠質細胞源性神經營養因子抗原
緩沖-蛋白胨溶液pH7.0人間充質干細胞-肝臟總RNAN-叔丁氧羰基-O-芐基-L-蘇氨酸Gelsolin 凝溶膠蛋白抗原
KLK10/FITC 熒光素標記激肽釋放酶10IgG環核苷酸陽離子通道蛋白α2三Rat MAG (Myelin Associated Glycoprotein) 檢測試劑盒
KLK14/FITC 熒光素標記激肽釋放酶14IgG鈣連蛋白3-氨基甲酰胺Rat FETUA (Fetuin A) 檢測試劑盒
KLRF1/NKp80/FITC 熒光素標記細胞性受體NK-p80IgG二氫嘧啶酶相關蛋白23-氨基甲酰胺Rat DKK3 (Dickkopf Related Protein 3) 檢測試劑盒
K-ras/FITC 熒光素標記原癌基因K-rasIgG細胞色素P450ⅡE13-氨基甲酰胺Rat ACE2 (Angiotensin I Converting Enzyme 2) 檢測試劑盒
KT3 tag/FITC 熒光素標記KT3 tag標簽IgG趨化因子受體1對氨基乙Rat AGE (Advanced Glycation End Product) 檢測試劑盒
KT3 tag/HRP 辣根過氧化物酶標記KT3 tag標簽IgG磷酸化原癌基因c-Raf對氨基乙Rat IDE (Insulin Degrading Enzyme) 檢測試劑盒
KCNA5/FITC 熒光素標記通道混合相關蛋白亞型5IgG磷酸化致癌基因C-Myc對氨基乙Rat CAT(Catalase) 檢測試劑盒
Ku-70/FITC 熒光素標記DNA修復酶Ku70IgGCD333-溴-5-甲Rat TBA(Total bile acid) kit
20號染色體開放閱讀框106抗體熱帶假絲酵母Mouse SOST (Sclerostin) Kit
球孢白僵Mouse LCAT (Lecithin-Cholesterol Acyltransferase) Kit
漆柄小孔Mouse PIIINP (N-Terminal Procollagen III Propeptide) Kit
血痕韌革Mouse -3 (Neurotrophin-3) Kit
梅林青霉Mouse CD163 (Cluster of Differeiation 163) Kit
鏈霉Mouse DPP4 (Dipeptidyl Peptidase IV) Kit
聚生殼Mouse EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor) Kit
葡萄座腔Mouse EG-VEGF (Endocrine Gland Derived Vascular Endothial Growth Factor) Kit
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