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玉米迪克氏菌保存

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品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-12-01 13:33:18瀏覽次數(shù):205次

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玉米迪克氏菌保存低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。

規(guī)格參數(shù):
資源名稱  玉米迪克氏菌保存
種屬: Dickeya zeae

提供形式: 凍干物

安全等級: 1

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 天門冬酰胺

培養(yǎng)基: 0002

生長條件: 30℃

存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

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儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長條件 30℃,好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,產(chǎn)品僅用于科研將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對穩(wěn)定的細(xì)菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。
人角膜成纖維細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基腦膜炎奈瑟菌拉丁屬名: Neisseria meningitidis

人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基金龜子綠僵菌用途: 生物防治

OptiTDS™小鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞組織解離液谷氨酸棒桿菌拉丁屬名: Corynebacterium  glutamicum

PrimaCell™小鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞試劑盒釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基腐生葡萄球菌腐生亞種注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

人脂肪細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

人表皮黑色素細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基喜肌費(fèi)爾酵母拉丁屬名: Fellozyma inositophila

小鼠腦微血管細(xì)胞組織處理緩沖液橄欖鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces  olivaceus

小鼠腦微血管細(xì)胞*培養(yǎng)基青紫黑鏈霉菌拉丁屬名: Syntrophomonas glaucovioatratus

Primarker™小鼠腦微血管細(xì)胞鑒定試劑盒豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS34規(guī)格: 1ml

PrimaCell™小鼠腦微血管細(xì)胞試劑盒乳微桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

OptiTDS™小鼠腦微血管細(xì)胞組織解離液小馬勃3-2注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基東方伊薩酵母拉丁屬名: Issatchenkia  orientalis

Primarker™小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞鑒定試劑盒冷湖黃桿菌拉丁屬名: Flavobacterium psychrolimnae

小鼠腦微血管細(xì)胞生長因子少根根霉拉丁屬名: Rhizopus arrhizus

FibrOut™小鼠腦微血管細(xì)胞成纖維抑制劑解蛋白弧菌拉丁屬名: Vibrio proteolyticus
四號瓊脂基礎(chǔ)      *250No.4 Agar Base

我妻氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)     *250Wagstsuma Agar Base

60%/L化鈉蛋白胨肉湯    *25060%/L NaCl Peptone Water

化鈉三糖鐵     *250NaCl Triple Sugar Iron Agar

胰胨大豆瓊脂斜面(TSA)   *250Tryptic Soy Agar

42℃生長培養(yǎng)基       *25042℃growth Medium

O/F培養(yǎng)基(HLGB)    *250O/F Medium
玉米迪克氏菌保存RAPD引物1克

17372-87-1曙紅Y水溶Acid Red 87

ELECTROSNAP8%ELECTROSNAP 試劑盒 8%500MLRT

4-溴-2- 4-Bromo-2-fluoro,99% 51436-99-8 5G 通用試劑

角鯊烯/反式角鯊烯/全反-2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-廿四碳六烯/鯊烯/三十碳六烯/角鮫油素/魚肝油萜/2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-二十四碳六烯/Squalene BR,99% 25毫升 國產(chǎn)/進(jìn)口

Lead(II)acetatebasic堿式醋酸鉛5克CP,98.5%

79-05-0丙酰胺PropionaMide;Propionic acid aMide

potewwiumxy7nogenphthalate本二酸氫鉀100克CP,97%

對磺酸鈉 p-sulfonic acid sodium salt,95% 657-84-1 50G 通用試劑

溴代十二烷 1-Bromododecane,97% 143-15-7 100G 通用試劑
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,產(chǎn)品僅用于科研可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。

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