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elisa定量試劑盒病原菌毀壞柱孢霉分子定量檢測(cè)實(shí)驗(yàn)討論

時(shí)間:2017-11-9閱讀:171
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elisa定量試劑盒本研究建立了一種針對(duì)三七植株根際土壤中根腐病重要病原真菌毀壞柱孢霉的分子定量檢測(cè)方法。該方法擺脫了傳統(tǒng)的純培養(yǎng)過(guò)程,與傳統(tǒng)檢測(cè)方法相比,具有、簡(jiǎn)單和快速等諸多優(yōu)點(diǎn)。另外,本研究也初步探討了三七植株根際土壤毀壞柱孢霉數(shù)量與植株生物量以及 AM 真菌侵染程度之間的數(shù)量效應(yīng)關(guān)系。實(shí)時(shí)熒光定量分析包括相對(duì)定量和定量,兩者各有優(yōu)缺點(diǎn)和特定應(yīng)用范疇,需要根據(jù)研究者的研究目的選擇使用。、
因此,在三七種植前,種植地塊的選擇對(duì)三七生產(chǎn)過(guò)程中根腐病病害的發(fā)生與否以及發(fā)生程度至關(guān)重要。目前關(guān)于該病原菌數(shù)量與三七根腐病發(fā)生的臨界閾值還缺乏深入的研究,該問(wèn)題的解決將為三七種植地塊的選擇提供重要的決策支持。三七根腐病主要表現(xiàn)為地上部萎蔫,塊根中部及末端出現(xiàn)組織腐爛壞死。通過(guò)分析發(fā)現(xiàn)三七根際土壤毀壞柱孢霉 基因序列片段的拷貝濃度與植株地上部生物量呈顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系,而與根系生物量相關(guān)關(guān)系不顯著。分析其原因我們認(rèn)為三七植株根系被該病原菌侵染后消耗其營(yíng)養(yǎng)轉(zhuǎn)化為自身生物量,并通過(guò)影響植株生理作用引起其地上部的黃化、萎蔫。由于光合作用受阻和營(yíng)養(yǎng)向下傳遞的雙重作用,植株地上部生物量急劇下降。
本研究采用了定量分析的方法,它可以得到各個(gè)不同樣本中目的基因的拷貝數(shù)和濃度,結(jié)果顯示發(fā)病植株根際土壤毀壞柱孢霉 基因序列片段的拷貝濃度顯著高于健康植株,另外對(duì)三七植株根系內(nèi)的毀壞柱孢霉進(jìn)行相對(duì)定量分析也發(fā)現(xiàn)發(fā)病植株根系毀壞柱孢霉相對(duì)數(shù)量顯著高于健康植株(結(jié)果未顯示),這說(shuō)明該病原菌在三七根腐病的發(fā)生過(guò)程中的確具有重要作用,這也驗(yàn)證了前人的研究結(jié)果。毀壞柱孢霉是一種多寄主病原菌,普遍存在于農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中,能侵染多種作物并對(duì)其產(chǎn)生不同程度的傷害,目前報(bào)道較多的有蘋果、人參、西洋參和油橄欖等。

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