手机版av在线_96精品国产aⅴ在线观看_中文字幕35页_国产亚洲成AV人片在线观黄桃_全黄性色大片_免费视频h

上海邦景實業有限公司
初級會員 | 第10年

15000017673

elisa試劑盒
原代細胞
細胞系
細胞培養試劑
血清
細胞因子
標準品
生化試劑
RNA/DNA提取
PCR檢測試劑盒
elisa kit
細胞
PCR基因檢測試劑盒
菌種
科研抗體
生化檢測試劑盒
檢測試劑盒
PCR相關試劑

細胞復蘇操作流程

時間:2025/3/31閱讀:225
分享:

細胞復蘇是指將凍存在液氮里邊或者-80℃冰箱中的細胞解凍,再培養傳代。細胞復蘇應采用快速融化的方法,這樣的目的是為了讓細胞外結晶在很短的時間內融化,從而避免慢悠悠的融化,使得水分滲入細胞內再結晶,從而對細胞再次造成傷害,從而影響細胞的存活率。

細胞復蘇操作流程:

1:細胞是凍在-80℃的環境里面的,所以拿出來后,應該盡快去37℃水浴鍋里解凍(我一般是放在PE手套里面,然后在37攝氏度的水域上快速融化。)這一步的操作不要超過一分鐘!

2:用預熱的培養基稀釋凍存的細胞(這步我會把融化的凍存液加入到15ml的管子里,加入3ml的預熱的培養液,在超凈臺里完成)

3:離心200g 5-10min,具體的離心的時間不同的細胞略有不同得具體得看培養的protocol

4:在離心以后,倒掉上清(因為凍存液里用DMSO, 它的作用是在凍存細胞時加入,加入的量大概是總體積的10%,起到防凍劑的作用,防止冷凍過程中細胞內形成冰晶。)

5:用預熱的培養液重懸細胞(根據培養的細胞皿的體積調整,我參照了GM12878,K562的培養protocol,剛開始的細胞密度不要超過10^6 /ML,但是細胞的密度也別太稀了,要不然長的會不好)

6:放到37℃,5%的二氧化碳培養箱中培養細胞。

PS:在看細胞凍存和復蘇的時候,有一個詞叫做“慢凍快融",所以在解凍細胞的時候,在加入預熱的培養基洗細胞之前,操作盡量的快,減少DMSO對細胞的傷害。我的凍存液的配方是:90%的FBS+10%的DMSO,凍存效果沒問題!


會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
在線留言
主站蜘蛛池模板: 插插插干干干 | 久草在线在线精品观看 | 国产精品原创巨作av色鲁 | A级国产乱理论片在线观看 亚洲激情第一页 | 免费黄色大片 | 国色天香免费视频日本 | 精品成人免费 | 麻豆福利影院 | 国产成人精品视频免费 | 亚洲一区欧美一区 | bilibili麻豆| 91精品国产色综合久久不卡98最新章节 | 精品人妻一区二区三区四区在线 | 日韩黄色在线播放 | 男女后进式猛烈XX00免费视频 | 玖草影院| 久久AV无码乱码A片无码 | 99久久免费看精品国产一区 | 午夜影院 | 日本www免费视频网站在线观看 | 黄色免费在线观看网站 | 无码区日韩特区永久免费系列 | 国产91精品精华液一区二区三区 | 国产区精品视频线二代 | 天美av一区二区三区久久 | 麻豆区1免费 | 免费av毛片不卡无码 | 亚洲区激情区无码区日韩区 | 日本精品一区二区三区四区 | 99在线国内在线视频22 | 良家小少妇潮喷内射 | 国产亚洲精品久久久久久青梅 | 亚洲AV永久无码精品三区在线4 | 一级毛片观看 | 国产精品美女视频 | a级国产乱理伦片在线观看 www在线免费 | 国产一区国产二区在线观看 | 色偷偷一区二区无码视频 | 天堂av性爱在线 | 成人午夜影视 | 亚洲aa视频|