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貨號(hào)	A01X1069	規(guī)格	1×106
英文名稱	L929細(xì)胞	產(chǎn)品分類	小鼠細(xì)胞系
實(shí)驗(yàn)類型	MEM+10%HS(馬血清）+1%P/S	報(bào)告	（STR鼠源鑒定）報(bào)告

公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

名稱	929 (小鼠成纖維細(xì)胞) (種屬鑒定正確)
別稱	NCTC 929; NCTC-929; L cell; L cells; L-cell; L-cells; L cell line; L; 種屬ain L-929; L-929; L 929; L929; L929(NCTC); Clone 929; Earles's cells; Earle's L cells
種屬	小鼠
年齡（性別）	雄性，100日齡
組織來(lái)源	未知
生長(zhǎng)特性	貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)	成纖維細(xì)胞樣
背景描述	NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of 種屬ain L]細(xì)胞是1948年3月建立的細(xì)胞系L的克隆株；細(xì)胞系L是最早建立的連續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞系之一，而NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of 種屬ain L]是最早的克隆株。從一只100日齡的雄性C3H/An小鼠的皮下疏松結(jié)締組織入脂肪組織中建立了親本細(xì)胞系L，第95代的細(xì)胞系L使用毛細(xì)管法分離單細(xì)胞建立了NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of 種屬ain L]。
生物安全等級(jí)	1
生長(zhǎng)培養(yǎng)基	MEM＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例	1:3-1:4
推薦換液頻率	2~3次/周
倍增時(shí)間	~28-36小時(shí)
凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮
培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃
致瘤性	Yes, in immunosuppressed mice.
保藏機(jī)構(gòu)	ATCC; CCL-1 ATCC; CRL-6364BCRC; 60091 BCRJ; 0188 DSMZ; ACC-2 ECACC; 85011425 ECACC; 85103115 ECACC; 88102702

細(xì)胞傳代：

1. L929小鼠成纖維細(xì)胞試驗(yàn)準(zhǔn)備：200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號(hào)筆，培養(yǎng)皿，離心管。

2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。

3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分鐘(37℃，5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁，觀察到細(xì)胞從壁上脫落下來(lái)為止。

4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應(yīng)。

5. 用 Tip 頭多次吹吸，使細(xì)胞分散開(kāi)。

6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中，1000rpm 離心 5min。

7. 用培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，細(xì)胞計(jì)數(shù)后選擇 0.8X106 個(gè)細(xì)胞加入一個(gè) 35mm 培養(yǎng)皿。

8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中，混勻細(xì)胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中，使其均勻分布。

9. 將培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第二天轉(zhuǎn)染。

細(xì)胞轉(zhuǎn)染：

1. 轉(zhuǎn)染試劑的準(zhǔn)備

① 將 400ul 去核酸酶水加入管中，震蕩 10 秒鐘，溶解脂狀物。

② 震蕩后將試劑放在－20 攝氏度保存，使用前還需震蕩。

2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質(zhì)體體積：DNA 質(zhì)量)來(lái)轉(zhuǎn)染細(xì)胞。在一個(gè)轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無(wú)血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑，再次震蕩。

重組人白細(xì)胞介su-17 (活性的)	眼蜱通用PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
展開(kāi)青霉PCR試劑盒	蓋膜蛋白βELISA試劑盒
人促性腺激su釋放激su(GnRH)ELISA試劑盒	輔meiQ10ELISA試劑盒
人ADP-核糖基化因子4(ARF4)試劑盒ELISA	肝配蛋白A受體3ELISA試劑盒
人泛su蛋白D(UBD)檢測(cè)試劑盒elisa	封閉蛋白1ELISA試劑盒
人G蛋白偶聯(lián)受體109A(GPR109A)ELISA試劑盒	轉(zhuǎn)位因子蛋白2ELISA試劑盒
FLAG Tag多肽	馬梭菌PCR試劑盒
核suan內(nèi)切meiG封閉多肽	毛樣枝孢霉PCR檢測(cè)試劑盒
DPRX蛋白封閉多肽	五種致瀉性大腸桿菌PCR檢測(cè)試劑盒(PCR 熔解曲線法)
長(zhǎng)鏈脂肪suan延長(zhǎng)mei長(zhǎng)ELOVL5封閉多肽	禽肺病毒（APV）核suan檢測(cè)試劑盒
D型-過(guò)氧化mei活化增生受體封閉多肽	歐洲放線菌PCR試劑盒
Ⅲ型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白封閉多肽	L929小鼠成纖維細(xì)胞泌尿道致病性大腸桿菌PCR試劑盒
液泡蛋白分選蛋白28封閉多肽	梅拉哥病毒RT-PCR試劑盒
9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框156封閉多肽	歐洲棕色野兔綜合癥病毒RT-PCR試劑盒
KIAA1958蛋白封閉多肽	瘧原蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)基本操作：
①進(jìn)無(wú)菌室前要洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開(kāi)始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動(dòng)作要輕，安裝吸管帽、打開(kāi)或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過(guò)燒灼進(jìn)行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長(zhǎng)時(shí)間燒灼，以防退火；燒過(guò)的器械要冷卻后才能使用；已吸過(guò)培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會(huì)產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時(shí)會(huì)將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細(xì)胞培養(yǎng)用品過(guò)火焰是也不能時(shí)間太長(zhǎng)，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細(xì)胞，同時(shí)塑料細(xì)胞培養(yǎng)用品也會(huì)產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過(guò)早開(kāi)瓶，開(kāi)瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細(xì)菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細(xì)胞在處理之前勿過(guò)早暴露在空氣中。
④操作時(shí)盡量不要談話，咳嗽以防止來(lái)自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細(xì)胞懸液時(shí)，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴(kuò)大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應(yīng)整理好工作臺(tái)面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺(tái)面；防止細(xì)胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來(lái)的或是自己所建的細(xì)胞系都要早期留有的充足的凍存儲(chǔ)備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細(xì)胞遺傳學(xué)方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細(xì)胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細(xì)胞使用。