細胞傳代密度問題與解決方案：

1.傳代密度過高

一旦細胞養(yǎng)太久至融合度過高（>90%）才傳代，容易使細胞產(chǎn)生老化現(xiàn)象，甚至是堆疊，再消化細胞時不易吹打成單顆細胞，即便再重新鋪盤傳代，細胞也無法回到原本的特性了。（如：單層細胞，沒長滿就發(fā)生堆疊現(xiàn)象）

解決方案：

盡量避免融合度過高，鏡下觀察融合度約達到80%即可傳代分盤。

細胞融合度：在細胞培養(yǎng)中指的是細胞在培養(yǎng)表面（培養(yǎng)皿/瓶）所占的比例。

2.傳代密度過低

哺乳動物貼壁培養(yǎng)細胞，若細胞培養(yǎng)到80-90%密度需要開始傳代，在傳代接種細胞密度過低，細胞間距離太遠，就無法在細胞間產(chǎn)生黏附及通信作用，幫助信號傳導(dǎo)并活化細胞；總體細胞量不足，分泌的生長因子濃度會不足以產(chǎn)生利于生長的微環(huán)境，以上皆會造成增殖速度遲緩或細胞死亡。

解決方案：

細胞傳代時，要進行準確的細胞計數(shù)，確保鋪盤的密度。