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重要事情說三遍:ELISA試劑盒操作的重要事項(xiàng)

閱讀:73發(fā)布時(shí)間:2017-10-10

ELISA試劑盒跟著我國市場(chǎng)和科研技術(shù)的快速老練,現(xiàn)在我國對(duì)酶聯(lián)免疫吸附剖析辦法研討上的技術(shù)現(xiàn)已十分老練,現(xiàn)在由國內(nèi)自主研制的elisa試劑盒和國外的elisa試劑盒在質(zhì)量能夠持平,做出來的數(shù)據(jù)現(xiàn)已到達(dá)相同的技術(shù)指標(biāo),由國內(nèi)自主研制的酶聯(lián)免疫吸附法elisa試劑盒現(xiàn)已成功了進(jìn)口酶聯(lián)免疫elisa試劑盒在我國市場(chǎng)的獨(dú)占位置,甚至在未來的一兩年內(nèi)能夠超越國外的elisa試劑盒的技術(shù)水平,這是國人的驕傲,更是我國科研人員的驕傲!
國內(nèi)的的ELISA試劑盒質(zhì)量現(xiàn)已很老練了,進(jìn)口的東西僅僅消費(fèi)者心理比較簡單得到滿意,其實(shí)用起來作用是差不多的,進(jìn)口原裝的elisa試劑盒的價(jià)格是國產(chǎn)elisa試劑盒的好幾倍呢,國內(nèi)的技術(shù)水平仍是比較*的,為什么不支持國產(chǎn),我們國內(nèi)的試劑盒出口的國外價(jià)格也很高,其實(shí)消費(fèi)者就是買個(gè)心理安心買足,理智的消費(fèi)者仍是會(huì)選擇國產(chǎn)elisa試劑盒,這個(gè)我僅僅提個(gè)小小的意見,其實(shí)是差不多的。
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反響孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗刷緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗刷,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反響孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗刷。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反響孔中,參加新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗刷。
4. 加底物液顯色:于各反響孔中參加暫時(shí)制造的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5. 停止反響:于各反響孔中參加2M硫酸0.05ml。
6. ELISA試劑盒成果斷定:可于白色背景上,直接用肉眼調(diào)查成果:反響孔內(nèi)色彩越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反響為無色或極淺,根據(jù)所呈色彩的深淺,以“+”、“-”號(hào)表明。也可測(cè)O·D值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O·D值,若大于規(guī)則的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。

 


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