一、挑選試劑
挑選質量的檢查試劑，嚴格依照試劑闡明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
二、加樣
也許因素：
1）血清或血漿標本別離欠好即進行加樣; 2）手藝操作中，加樣板過多形成加樣后放入孵箱前等待時刻過長（特別是室內溫度較高時）; 3）加完標本再加酶試劑時酶濺起孔外。
三、 孵育
也許因素：
1） 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸騰，吸附于孔壁，難于清洗*; 2） 孵育時刻人為延伸，致使非特異性緊附于反響孔周圍，難以清洗*。
解決辦法：
1） 貼封片或加蓋; 2） 按闡明過程嚴格控制操作時刻。
四、洗板
也許因素：
1） 選用手藝洗板，孔與孔之間液體穿插。 2） 選用半自動洗板機洗板時，洗液量缺乏，致使洗板不*;洗板針阻塞，抽吸不*;洗板不暢，致使洗板作用差。 3） 反響板過多形成洗板等待時刻長。
解決辦法：
1） 保證洗液注滿各孔，洗板針疏通，洗完板后在吸水紙（挑選干凈、無或少塵的吸水資料）上輕輕拍干; 2） 合理安排，或多用幾臺洗板機。
五、顯色
也許因素：
1） 顯色劑制造后放置時刻過長或運用過期顯色劑; 2） 加顯色劑時濺起孔外形成液體回流。
解決辦法： 1） 顯色劑盡量在臨用前制造，堅持不期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不必; 2） 加樣時保持顯色劑不外流; 3） A、B液應防止觸摸金屬器械。
六、停止
也許因素如加停止液時發生較多氣泡，致使假陽性添加。所以在加停止液時應防止發生氣泡。
七、讀板
如讀板時板底不清洗等。應保證酶標板清洗。所以在全部操作過程中保證酶標板不觸摸次氯酸; 盡也許完成ELISA檢查標準自動化，有用進步檢查質量。
在實際操作中，除了挑選試劑外，有必要嚴格依照操作過程進行操作，一起作好室內質控、室間質評，以謹慎的工作作風檢查每一份標本，才干保證檢查質量。如今國內已有適當數量的單位具有全自動酶標儀，這關于完成ELISA標準化檢查、進步檢查質量起到了重要作用。
