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切好的冷凍切片立即投入丙酮中進行固定,通常固定1~2 min即可進行染色,用于免疫組化染色的冷凍切片應在切片略干時立刻投入冷甲醇中固定10~15 rmin然后進行相應的安排化學染色程序。
1.冷凍切片的HE染色程序。
切片在丙酮中固定1~2 min。
水洗5 s。
在0.5%的鹽酸乙醇液中分解1~3 s。
水洗5 s。
甲苯I、二甲苯Ⅱ通明各5 s。
運用新鮮的Harris蘇木精染液染細胞核2min。
水洗5 s。
干安排周圍的二甲苯,在二甲苯尚未枯燥前滴加光學樹脂膠封片。
在0.5%~1%的伊紅染液中染細胞質20~30 s。
水洗5 s。
在95%乙醇I、95%乙醇Ⅱ、100%乙醇I、ELISA試劑盒100%乙醇Ⅱ、中逐級脫水各3~5 s。
ELISA試劑盒實驗冷凍切片的制作辦法
運用氯乙烷噴灑、二氧化碳噴發、半導體制冷的辦法均可制作通常的冷凍切片,用于術中的病理確診。恒冷箱冷凍切片機可以制作適用于各種目地的冷凍切片,是現在zui為常用的抱負冷凍切片制片方法。
標本冷凍完成后將標本托固定在切片機的機頭上,調整機頭方位使其剛好坐落切片刀的后方。
將恒冷箱冷凍切片機的速凍頭和箱內溫度調整到適合的切溫度,通常狀況下為一18~一25℃。
運用粗切削方法進行標本的粗切削至露出標本的zui大平面,ELISA試劑盒運用主動推動方法接連切削2~3刀后用毛筆清除機頭、標本托及切片刀上的安排碎屑。
以主動推動的方法進行切片,杰出的切片將在防卷板的下方形成一張完好平坦的薄片,如切片略有曲折可用小毛筆悄悄展平切片。
在標本冷凍托上涂布一層*一OCT,然后將選材后新鮮標本安放在標本冷凍托上并用OCT掩蓋標本。
打開防卷板,用載玻片平穩地輕壓切片使其平坦地吸附到載玻片上。
調整并承認切片的厚度,通常為4~8 um,染脂肪和神經安排應控制在12~25 um。
ELISA試劑盒實驗放下防卷板使防卷板的方位剛好與切片刀的刀刃*平行并略突出于刀刃。
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