ELISA試劑盒測定的標本十分廣泛，體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液)，有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)。

   大部分ELISA試劑盒檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只要待血清自然凝固、收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫學檢驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA試劑盒中血漿和血清可同等應用。因為雖然是相同的抗原，可能兩次包被不一樣。
  如果是同一批板，出現這種情況只能說明你的酶標二抗失活了，買新的二抗，按說明書上的稀釋倍數稀釋；陰性對照有顏色很可能是沒封閉好。陽性值是由你的抗原抗體間親和力決定的，增加抗原抗體用量，或提高二抗濃度，但靈敏度可能會降低，你可以重新摸下工作濃度；ELISA試劑盒中捕獲抗體與檢測抗體（不論多抗還是單抗）的配對很有講究。我們不希望捕獲抗體與檢測抗體競爭抗原上的同一位點，為此我們就需要確保捕獲抗體和的抗原表位不存在重疊。

  ELISA試劑盒如果捕獲抗體和檢測抗體之間發生了沖突，就會對實驗結果產生較大影響。要避免這一問題，我們可以選擇購買“matched pair"的捕獲/檢測抗體對，這些打包在一起的抗體是商家經過驗證才*的好組合。