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細(xì)胞培養(yǎng)的原理

時(shí)間:2015-2-27閱讀:219
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細(xì)胞培養(yǎng)(cell culture)或組織培養(yǎng)是指把從活體取出的組織細(xì)胞,在人工建立的無菌、適當(dāng)溫度和營養(yǎng)的條件下,模擬其在體內(nèi)的生長環(huán)境使其增殖或分化,并維持結(jié)構(gòu)和功能的一種技術(shù)。該技術(shù)可從細(xì)胞或亞細(xì)胞水平幫助人類揭示其生、老、病、死的有關(guān)規(guī)律,探索優(yōu)生、抗衰老、防治疾病的手段或途徑,人為地誘導(dǎo)細(xì)胞遺傳性狀的改變,使其向更有利于人類和自然界的方向發(fā)展。其中狹義的細(xì)胞培養(yǎng)是指:單個細(xì)胞或細(xì)胞群在體外用人工建立的無菌、合適的溫度和營養(yǎng)以及酸堿度適當(dāng)?shù)臈l件下,使其生存生長的一種操作技術(shù)。而組織培養(yǎng)( tissue culture)是指在營養(yǎng)及溫度等適當(dāng)?shù)臈l件下維持組織在體外生長的一種操作方法。在習(xí)慣上也泛指所有的體外培養(yǎng),即器官培養(yǎng)、組織培養(yǎng)和細(xì)胞培養(yǎng)的總稱。組織培養(yǎng)是20世紀(jì)初[Harrison, 1907; Carrel, 1912]才創(chuàng)建的一種研究動物細(xì)胞行為的方法,那時(shí)只是為了避開因正常的體內(nèi)自體調(diào)節(jié)以及實(shí)驗(yàn)應(yīng)激所可能產(chǎn)生的機(jī)體整體因素的影響。原代細(xì)胞培養(yǎng)也稱初代細(xì)胞培養(yǎng),是從供體直接取材獲取細(xì)胞后在體外進(jìn)行的培養(yǎng)。這是建立各種細(xì)胞系( cell line)的*步和基礎(chǔ),。在此期間,細(xì)胞的生物學(xué)性狀尚未發(fā)生很大變化,仍具有二倍體遺傳特性,在一定程度上能反映體內(nèi)狀態(tài)。此期細(xì)胞呈活躍狀態(tài),可見細(xì)胞分裂但不旺盛。原代細(xì)胞培養(yǎng)多由各種細(xì)胞成分組成,比較復(fù)雜,即使是經(jīng)過處理后的細(xì)胞,也仍具有異質(zhì)性,主要表現(xiàn)在細(xì)胞形態(tài)和大小不一。傳代細(xì)胞培養(yǎng)是指原代培養(yǎng)細(xì)胞一般經(jīng)過1~4周的培養(yǎng)后,將細(xì)胞從一個培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移養(yǎng)瓶的分離過程。在傳代期,細(xì)胞一般增殖旺盛,并能維持二倍體核型,大多數(shù)二倍體細(xì)胞在培養(yǎng)中維持有限生存期,體外zui多生存1年左右,傳30~50代,相當(dāng)于150~300個細(xì)胞增殖周期。為保持二倍體細(xì)胞的特性,細(xì)胞應(yīng)在初代培養(yǎng)期或傳代培養(yǎng)早期將部分細(xì)胞低溫保存,以防污染等的丟失并備用。

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