近期,研究人員采用鏈特異性RNA測序(RNA-seq)和全基因組DNA測序,繪制了Bristol N2野生型線蟲和三個ADAR突變體不同發(fā)育階段的RNA編輯圖譜。RNA編輯通過轉錄后插入、刪除或修飾RNA分子上的某些堿基,增加轉錄組多樣性。研究人員發(fā)現(xiàn)RNA編輯發(fā)揮重要的作用,如改變神經(jīng)遞質或離子通道的特定密碼子、創(chuàng)建新的剪接位點、修飾miRNA種子序列及其靶位點,并通過與RNAi通路競爭而保護前體mRNA。
RNA編輯是所有多細胞動物中的一個普遍現(xiàn)象。zui主要的RNA編輯是A(adenosine)-to-I(Inosine) 的修飾,其受到蛋白酶ADAR(adenosine deaminases that act on RNA )的催化調控,ADARs對于哺乳動物*,但是它們在A-to-I編輯中的個體效應仍不明確。ADAR1+/?突變小鼠如果造血系統(tǒng)有缺陷,在胚胎期14天之前就會死亡。ADAR1+/?小鼠逐漸傾向于在P12后癲癇發(fā)作及早逝。
在無脊椎動物中,果蠅(Drosophila melanogaster)有一個單一的ADAR2樣基因,稱為Dmel\Adar (也稱為dADAR),刪除這個基因可導致運動失調和溫度敏感麻痹。秀麗隱桿線蟲(Caenorhabditis elegans)有兩個ADAR基因——adr-1和adr-2,但是它們在A-to-I編輯中各自發(fā)揮什么作用仍不清楚。缺乏一個或兩個基因的線蟲是可育的,只表現(xiàn)出輕微的趨化性缺陷,這使線蟲成為研究ADARs影響的*模型。
zui近,新一代測序和生物信息學技術被用于在人類和果蠅中識別基因組規(guī)模上的數(shù)百萬個RNA編輯事件。然而,線蟲中的RNA編輯圖譜在很大程度上還是未知的。到目前為止,在線蟲中只有10個基因已發(fā)現(xiàn)在非編碼區(qū)被編輯。RNA編輯是否在不同的發(fā)育階段被調控,也尚不明確。
在這項研究中,研究人員采用鏈特異性RNA測序(RNA-seq)和全基因組DNA測序,繪制了Bristol N2野生型線蟲和三個ADAR突變體不同發(fā)育階段的RNA編輯圖譜。該研究小組還開發(fā)出一種新的計算程序,用“bisulfite-seq-mapping-like"步驟,獲得了識別敏感度的三倍增加。在基因簇中發(fā)現(xiàn)了共99.5%的A-to-I編輯位點。在3080個編輯簇中,65.7%的與非編碼區(qū)域中的DNA轉座子重疊,73.7%的能夠形成發(fā)夾結構。