檢測原理：

    本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中鵝胰島素(Insulin)水平。用純化的鵝胰島素(Insulin)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入胰島素(Insulin)，再與HRP標記的胰島素(Insulin)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰島素(Insulin)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中鵝胰島素(Insulin)濃度。

操作程序

1.準備試劑：準備樣品和標準品。

2.加樣：加入準備好的樣品和標準品。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

8. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10-20分鐘。

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白孔調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值），測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

注意事項：

1.請每次測定的同時做標準曲線，最好做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數（×n×5）。

2.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

3.為免交叉污染，要避免重復使用手中的吸頭和試管。

4.要嚴格避免操作過程中酶標板干燥。干燥會使酶標板上生物成份迅速失活。  

5.嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。

6.顯色時間供參考，因用戶實驗室條件差異，最佳顯色時間會有所不同。

7.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

8.本試劑不同批號組分不得混用。

9.揭封板膜和覆蓋封板膜時應避免用力過大導致液體濺出。

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