根據(jù)上海滬鼎技術(shù)員的實驗總結(jié),發(fā)現(xiàn)ELISA抗體重點。以往大家主要關(guān)注的是抗體的選擇與保存,那么在今天的內(nèi)容里,我們將主要了解抗體的純度、來源、應(yīng)用。
重點一:抗體的純度
親和層析純化的抗體一般更受人們歡迎,因為這些產(chǎn)品的純度zui高,產(chǎn)生的非特異性背景zui少。但是有些情況下也要考慮到純化過程中損失的IgG部分,因為其中含有親和力很高的抗體,尤其是當目的抗原存在的量很小的時候,高親和性的IgG部分就顯得尤為重要。
重點二:一抗的物種來源
一抗是在什么物種來源的,相應(yīng)的二抗也要是抗該物種的抗體。例如,如果一抗是在小鼠體內(nèi)制備的,那么你就應(yīng)當選擇抗小鼠的二抗,如果一抗是在兔體內(nèi)制備的,那么二抗就應(yīng)當是抗兔的抗體。至于二抗本身是在什么動物中制備的對二抗的質(zhì)量并無明顯的影響。
一抗是屬于哪個類或亞類?二抗需與一抗的類別或亞類相匹配。這通常是針對單克隆抗體而言。多克隆抗體主要是IgG類免疫球蛋白,因此相應(yīng)的二抗就是抗IgG抗體。
重點三:常規(guī)抗體的應(yīng)用
常規(guī)抗體優(yōu)點包括Fc區(qū)域能夠激活機體的免疫反應(yīng)并結(jié)合到目標分子上使之被破壞。用完整抗體的缺點包括由于其分子太大不能被滲入到某些組織中。Fc區(qū)域通常能引起一些非特異性的結(jié)合,對抗體的檢測的應(yīng)用不利。
常規(guī)抗體在科研中用于通過蛋白質(zhì)印跡、免疫組織化學以及酶聯(lián)免疫吸附法等方法檢測目的蛋白已經(jīng)有十年了。溫馨提示:上海滬鼎生物科技有限公司所有產(chǎn)品不用與臨床的檢測。
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