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人心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒說明書

時間:2014-1-27閱讀:281
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人心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒試驗原理:
ANP試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知ANP濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將ANP和*標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中ANP的濃度呈比例關系。
人心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒內容及其配制:
試劑盒成份
96孔配置
48孔配置
96/48人份酶標板
1塊板(96T)
半塊(48T)
塑料膜板蓋
1塊
半塊
標準品:400pg/ml
1瓶(1.0ml)
1瓶(0.5ml)
空白對照
1瓶(1.0ml)
1瓶(0.5ml)
標準品稀釋緩沖液
1瓶(8.0ml)
1瓶(4.0ml)
*標記的抗ANP抗體
1瓶(8.0ml)
1瓶(4.0ml)
親和鏈酶素-HRP
1瓶(12ml)
1瓶(6.0ml)
洗滌緩沖液
1瓶(20ml)
1瓶(10ml)
底物A
1瓶(6.0ml)
1瓶(3.0ml)
底物B
1瓶(6.0ml)
1瓶(3.0ml)
終止液
1瓶(6.0ml)
1瓶(3.0ml)
自備材料:
蒸餾水。
加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。
樣品收集、處理及保存方法:
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
操作注意事項:
試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照人心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

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